英文名 CY2-SE
CAS号 186205-33-4
分子量 643.469
分子式 C29H30IN3O6
熔点 N/A
Cyanine2-NHS(Cy2-NHS,CAS号 186205-33-4)是一种基于Cyanine2(Cy2)荧光母核的N-羟基琥珀酰亚胺酯活性衍生物,专用于与含有伯胺(—NH₂)基团的分子发生高效共价偶联反应,从而实现蛋白质、多肽、核酸、纳米材料等的荧光标记。Cyanine2 属于典型的花菁类(Cyanine)绿色荧光染料,具有高亮度、良好的光稳定性和较高的量子产率,其光谱特性与FITC(荧光素异硫氰酸酯)相似,但在光漂白耐受性、信噪比以及稳定性方面更优,因此被广泛应用于需要高分辨率和长时间成像的生物检测与成像实验中。
结构与反应原理
Cyanine2-NHS 由Cy2染料母核通过化学修饰引入NHS酯基团制得。NHS酯(N-hydroxysuccinimide ester)是一种经典的氨基反应活性基团,在温和的弱碱性条件(通常 pH 7.5–8.5)下,能够与伯胺发生亲核取代反应,生成稳定的酰胺键。这种偶联反应效率高、副产物单一(仅为NHS分子),且在无金属催化的生理条件下即可进行,非常适合对生物大分子进行温和且高选择性的标记。通过这一反应,Cy2荧光团被稳定地连接到靶分子上,实现长期、稳定的荧光信号输出。
光谱与成像特性
Cy2-NHS 具有鲜艳的绿色荧光,激发峰通常在 490–500 nm 之间,发射峰在 510–520 nm 范围内,与常用的488 nm激光线高度匹配,可与FITC检测通道通用。与FITC相比,Cy2-NHS 的摩尔消光系数更高(可达 1.5×10⁵ M⁻¹·cm⁻¹ 以上),量子产率更高(接近 0.2–0.3),并且在光照条件下不易发生光漂白,因此适合长时间、高强度激发的成像应用,如激光共聚焦显微镜、TIRF显微镜及高通量显微成像系统。
主要应用
蛋白质标记:可与抗体、酶、受体蛋白等含氨基的蛋白质反应,制备荧光标记抗体用于免疫荧光显微镜、流式细胞术(FACS)、免疫印迹(Western blot)等实验。
核酸探针修饰:标记带氨基修饰的寡核苷酸或适配体,用于荧光原位杂交(FISH)、实时定量PCR探针、分子探针成像等。
多重荧光标记:在多通道成像中,Cy2可与Cy3、Cy5等染料组合,实现多目标同时检测。
纳米材料与表面功能化:将Cy2-NHS偶联到带有氨基修饰的纳米颗粒、量子点、聚合物微球或玻片表面,实现荧光探针或生物芯片的构建。
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