常用名 5-氯甲基荧光素二乙酸酯
英文名 Cellhunt Green CMFDA [5-Chloromethylfluorescein Diacetate]
CAS号 136832-63-8
分子量 464.85100
密度 1.49 g/cm3
沸点 657.5ºC at 760 mmHg
分子式 C25H17ClO7
闪点 238.3ºC
CellTracker Green CMFDA(5-氯-2-甲基苯基硫代氟罗黄酯)是一种高效的绿色荧光活细胞示踪探针,广泛应用于细胞成像和活细胞追踪实验。
其激发波长约为492 nm,发射波长在517 nm左右,呈现明亮的绿色荧光信号。该探针专为活细胞设计,能够穿透细胞膜进入细胞质,并在细胞内被酯酶水解生成具有荧光性的亲水产物,从而实现长期稳定的细胞标记。
化学结构上,CMFDA 属于酯化荧光染料,含有可被细胞内酯酶水解的非荧光性乙酯基团。进入细胞后,酯基被水解生成极性荧光分子,该分子因亲水性而被牢固保留在细胞质内,减少细胞间扩散。此机制不仅保证了染料在单个细胞内的长期稳定性,还提高了信号亮度和信噪比。
CellTracker Green CMFDA 可广泛应用于细胞迁移、细胞增殖、细胞融合以及多通道荧光成像实验。其高亮度和低背景特性,使其能够在低浓度下提供清晰的荧光信号,并且在与其他荧光染料(如红色或橙色探针)共用时,光谱干扰较小,适合多色成像分析。该染料在长时间显微镜观察或激光扫描条件下的光稳定性较高,即使长时间曝光也能保持稳定的信号,减少光漂白对实验结果的影响。
在操作上,CMFDA 染料使用简便,只需短时间孵育即可实现有效标记。其良好的水溶性和生物相容性确保了染料对细胞功能和生理状态的干扰极小,可以用于各种哺乳动物细胞和原代细胞类型。染料在体外培养条件下能够稳定存在数天,使其在时间序列实验、细胞追踪以及动态成像实验中表现优异。
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