产品名称：DPPE-PEG-Ce6，二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-Ce6的合成方法

合成方法

1 关键反应步骤

步骤1：DPPE-PEG的合成

反应类型：DPPE的乙醇胺部分与PEG的羧基或氨基通过酰胺键或酯键连接。

示例1：DPPE-NH₂ + PEG-COOH → DPPE-PEG-COOH（EDC/NHS活化羧基，生成酰胺键）。

示例2：DPPE-COOH + PEG-NH₂ → DPPE-PEG-NH₂（酰胺键），后续通过羧基化修饰引入反应位点。

条件：

溶剂：无水有机溶剂（如DMF、DMSO或氯仿），避免磷脂水解。

温度：40-60℃，反应时间12-24小时。

催化剂：EDC（活化羧基）和NHS（稳定中间体），提高反应效率。

步骤2：BCN的偶联

反应类型：BCN的羧基或氨基与DPPE-PEG的末端基团（如氨基或羧基）通过化学键连接。

示例1：DPPE-PEG-NH₂ + BCN-COOH → DPPE-PEG-BCN（EDC/NHS活化BCN的羧基，生成酰胺键）。

示例2：DPPE-PEG-COOH + BCN-NH₂ → DPPE-PEG-BCN（酰胺键）。

条件：

pH：7.0-7.5（避免羧基质子化或氨基去质子化）。

温度：室温或37℃，反应时间2-4小时。

摩尔比：DPPE-PEG:BCN = 1:1.2（优化反应效率）。

2 纯化与表征

纯化方法：

透析：截留分子量根据PEG链长选择（如10k Da），去除未反应试剂和副产物。

凝胶过滤色谱：Sephadex G-25或Superdex 200，分离目标产物与小分子杂质。

HPLC：反相C18柱，甲醇/水（含0.1% TFA）为流动相，纯化产物并测定纯度（>95%）。

表征方法：

结构确认：

¹H NMR：DPPE的亚甲基质子（δ≈1.2-1.5 ppm）、PEG的重复单元（δ≈3.5-3.8 ppm）和BCN的环丙烷质子（δ≈0.5-1.0 ppm）及环辛炔质子（δ≈2.0-3.0 ppm）。

MALDI-TOF：测定分子量，确认DPPE、PEG和BCN的连接。

功能验证：

点击化学反应效率：与叠氮化物（如DBCO-PEG-FITC）反应后，通过荧光光谱或HPLC检测产物生成量（反应效率通常>90%）。

动态光散射（DLS）：测定纳米颗粒粒径（如脂质体修饰后粒径约100-200 nm）。

Zeta电位：评估表面电荷（羧基去质子化后带负电，约-20 to -30 mV）。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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