产品名称：DPPE-PEG5000，二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇5000的合成方法

合成方法

1 关键反应步骤

步骤1：DPPE的活化

反应类型：DPPE的羧基或氨基需通过化学修饰引入反应位点（如羧基活化或氨基保护）。

示例1：DPPE-COOH的活化：

试剂：EDC（1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺）和NHS（N-羟基琥珀酰亚胺）。

条件：无水DMF（N,N-二甲基甲酰胺），pH 5.0-6.0，室温反应2-4小时，生成活化酯（DPPE-NHS）。

示例2：DPPE-NH₂的保护（若需）：

试剂：Fmoc-OSu（9-芴甲氧羰基琥珀酰亚胺）或Boc-ON（叔丁氧羰基-ON）。

条件：二氯甲烷（DCM）或DMF，pH 8.0-9.0，生成保护基修饰的DPPE（如DPPE-Fmoc）。

步骤2：PEG5000的偶联

反应类型：活化后的DPPE与PEG5000的末端基团（如氨基或羧基）通过酰胺键或酯键连接。

示例1：DPPE-NHS + PEG5000-NH₂ → DPPE-PEG5000-NH₂（酰胺键）。

条件：无水DMF，pH 7.0-8.0，室温反应12-24小时，摩尔比DPPE-NHS:PEG5000-NH₂ = 1:1.2。

示例2：DPPE-COOH + PEG5000-OH → DPPE-PEG5000-OH（酯键）。

试剂：DCC（二环己基碳二亚胺）和DMAP（4-二甲氨基吡啶）。

条件：无水DCM，室温反应24-48小时，生成酯键连接的产物。

2 纯化与表征

纯化方法：

透析：截留分子量3500-5000 Da的透析袋，去除未反应试剂和副产物（如EDC/NHS或DCC/DMAP）。

凝胶过滤色谱：Sephadex G-25或Superdex 200，分离目标产物与小分子杂质。

HPLC：反相C18柱，甲醇/水（含0.1% TFA）为流动相，纯化产物并测定纯度（>95%）。

表征方法：

结构确认：

¹H NMR：DPPE的亚甲基质子（δ≈1.2-1.5 ppm）、PEG的重复单元（δ≈3.5-3.8 ppm）及磷脂头部质子（δ≈3.0-4.5 ppm）。

MALDI-TOF：测定分子量，确认DPPE与PEG5000的连接（理论分子量：DPPE≈680 Da + PEG5000≈5000 Da → 总分子量≈5680 Da）。

功能验证：

动态光散射（DLS）：测定脂质体修饰后粒径（如100-200 nm）。

Zeta电位：评估表面电荷（羧基去质子化后带负电，约-20 to -30 mV）。

血液循环实验：通过小鼠尾静脉注射，测定血浆中DPPE-PEG5000修饰的纳米粒浓度随时间变化，验证半衰期延长效果。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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