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Cy5-CsA,CY5标记的环孢素A的合成步骤
发布时间:2025-08-21     作者:axc   分享到:

Cy5-CsA,CY5标记的环孢素A的合成步骤

Cy5-CsA 是环孢素A(Cyclosporin A)与 Cy5 荧光染料通过共价偶联形成的衍生物,用于分子示踪和生物体系研究。环孢素A 为11肽环状结构的环状多肽,分子中含有多种N-甲基氨基酸残基,具有羟基和次级胺等可供化学修饰的官能团。Cy5-CsA 的制备主要通过羟基或次级胺的活化与 Cy5 活性衍生物偶联实现。

制备步骤一般包括以下几个环节:首先,对环孢素A 的羟基或氨基进行选择性保护,以避免多位点非特异性反应。保护策略可采用三甲基硅基(TMS)或苄基保护羟基,以及使用Boc或Fmoc保护次级胺残基。在此基础上,形成单一或有限数量的活化位点,为后续偶联提供特异性。

第二步是荧光偶联。利用 Cy5-NHS 酯或 Cy5-MAL,在缓冲液或有机混合溶剂中与保护后的环孢素A 反应。NHS 酯可与环孢素A 的胺基形成酰胺键,而马来酰亚胺可与巯基发生选择性共价连接。反应条件一般控制在 pH 7–8.5 的缓冲体系中,温度保持室温至 25–30 ℃,并在惰性气氛下进行以防止氧化。

第三步为去保护与纯化。偶联产物反应完成后,通过酸性条件去除羟基或胺基保护基团,恢复环孢素A 的结构特征。随后通过高效液相色谱(HPLC)对 Cy5-CsA 进行分离纯化,确保产物的单分散性和高纯度。产物纯度及结构一般通过核磁共振(NMR)、质谱(MS)及荧光光谱分析确认。

终获得的 Cy5-CsA 分子兼具环孢素A 的环状多肽骨架及 Cy5 的红外荧光性能,能够在水相条件下保持稳定的荧光信号和分子活性。整个制备步骤的核心在于保护基选择、偶联反应条件的优化以及纯化方法的精确控制,通过精细化学操作实现了环孢素A 与 Cy5 的高效偶联,为荧光追踪和分子探针构建提供可靠材料。

产品名称:Cy5-CsA,CY5标记的环孢素A

纯度:95%+

性状:固体或液体

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家:齐岳生物

Cy5-CsA

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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