Cy5-HSA，CY5标记人血清白蛋白的反应条件设计

人血清白蛋白（Human Serum Albumin, HSA）是一种具有丰富赖氨酸残基和半胱氨酸位点的多肽蛋白，常用于药物载体及分子示踪研究。通过与Cyanine 5（Cy5）荧光团偶联，可形成Cy5-HSA，实现生物成像和药物递送分析。反应条件的优化对于标记效率、蛋白结构完整性和荧光性能至关重要。

反应条件设计

底物与荧光染料选择

HSA中赖氨酸氨基是常用偶联位点，可与Cy5-NHS酯反应形成稳定的酰胺键。半胱氨酸的硫醇基团也可与Cy5-MAL形成稳定硫醚键。根据实验需求选择合适的Cy5衍生物，以保证标记效率与蛋白功能保留。

缓冲体系与pH控制

偶联反应通常在碳酸氢盐缓冲液或磷酸盐缓冲液中进行，pH保持在7.5–8.5。碱性环境促进赖氨酸氨基的亲核性，从而提高与Cy5-NHS的偶联效率，同时避免蛋白质结构因过高pH而变性。

温度与反应时间

反应温度控制在室温或略低（20–25°C）即可，避免高温导致蛋白质变性或荧光团降解。反应时间一般为1–4小时，根据所需标记度调整。短时间反应可降低多重标记和蛋白结构影响，长时间反应可提高偶联率。

摩尔比与浓度

HSA与Cy5的摩尔比通常在1:3至1:10范围内优化，保证单分子或低标记度为主，以保持蛋白活性和溶解性。蛋白质浓度一般为1–5 mg/mL，便于反应均匀并避免蛋白聚集。

反应后处理与纯化

偶联反应完成后，通过透析、凝胶过滤或反相HPLC去除未反应的Cy5染料。此步骤可确保Cy5-HSA纯度和荧光信号均一，同时减少游离染料对实验干扰。

稳定性与储存条件

Cy5-HSA应在避光、4°C条件下短期储存，长期储存可冷冻在-20°C或-80°C，必要时添加甘油或蔗糖等稳定剂，以保持蛋白折叠和荧光性能。

总结

Cy5-HSA偶联条件通过荧光染料选择、缓冲pH控制、温度与时间优化、摩尔比调控及纯化步骤实现高效标记，同时保持蛋白结构完整和功能保留。优化的反应条件为Cy5-HSA在生物成像、药物载体研究和分子示踪实验提供可靠基础。

产品名称：Cy5-HSA，CY5标记人血清白蛋白

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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