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AF488 NHS,222164-96-7绿色荧光标记试剂
发布时间:2025-08-25     作者:zyl   分享到:

英文名 TFAX 488, SE

CAS号 222164-96-7

分子量 659.453

分子式 C25H15N3O13S2Li2

熔点 N/A

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AF488 NHS是一种广泛应用的绿色荧光标记试剂,属于 Alexa Fluor 系列染料。该化合物通过 NHS 酯活化的羧基,可以高效、特异性地与蛋白质、肽或其他含氨基的分子共价偶联,实现荧光标记

化学结构与性质

AF488 是一种荧光染料,其核心为改良型荧光素衍生物,结构中包含苯环和异苯并呋喃结构,赋予其绿色荧光特性(激发波长约 495 nm,发射波长约 519 nm)。通过 NHS 酯化,羧基被活化为 N-hydroxysuccinimide 酯(–CO–NHS),赋予分子与氨基的共价结合能力。

物理性质方面,AF488 NHS 为黄色至橙黄色固体,极易溶于干燥的有机溶剂如 DMSO、DMF、乙腈,水溶性有限,但在偶联后通常表现为水溶性荧光标记。其结构稳定,在干燥、避光条件下可以长期储存,但 NHS 酯对水分敏感,在水溶液中容易水解失活,因此应在使用前溶解并立即进行反应。

化学反应特性

AF488 NHS 的化学活性主要源于 NHS 酯:

氨基偶联反应:NHS 酯可与蛋白质或小分子中的一级或二级氨基发生亲核取代反应,生成稳定的酰胺键,实现荧光共价标记。

反应条件温和:反应通常在 pH 7–9 的缓冲体系中进行,反应高效,副反应少。

光学特性稳定:标记后的分子保持高荧光量子产率和明亮绿色荧光,具有极佳的光稳定性和耐光漂白特性。

空间选择性:NHS 酯反应特异性强,可通过调节反应比例控制标记程度,适用于多步化学修饰。

主要应用

AF488 NHS 在化学合成、材料功能化和荧光探针开发中具有广泛应用:

蛋白质和多肽标记:通过与游离氨基共价偶联,制备荧光标记蛋白或肽,用于分子追踪或荧光分析。

分子探针构建:可将 AF488 NHS 偶联至小分子、核酸或聚合物,实现荧光探针、传感器或功能化材料的开发。

多功能材料化学:在纳米颗粒、聚合物或表面材料上引入绿色荧光标记,实现可视化和功能化操作。

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