cy5-taxol,cy5标记紫杉醇的纯化方法
cy5-Taxol是Cy5荧光染料标记的紫杉醇衍生物,通过共价结合形成稳定化合物。纯化与表征是确保其结构完整性、荧光性能及后续应用的重要环节。
纯化方法:
初步反应终止
偶联反应完成后,可通过稀释或加入适量缓冲液终止反应,防止染料继续水解或副反应。
固相萃取(SPE)
使用C18固相萃取柱去除反应体系中的游离Cy5和有机溶剂残留。
样品先用水润湿,再用低性溶剂(如乙腈)洗脱Cy5-PTX。
SPE可初步提高纯度,同时降低杂质干扰。
高效液相色谱(HPLC)纯化
反相HPLC(C18柱)用于分离Cy5-Taxol和未反应紫杉醇及游离染料。
梯度洗脱体系(如水-乙腈含0.1% TFA)可实现高分辨率分离。
收集目标峰,冻干储存,保证长期稳定性。
表征方法:
质谱分析(MS)
电喷雾质谱(ESI-MS)可确认分子量及偶联成功。
通过分子离子峰与理论分子量对比,判断标记效率和副产物情况。
紫外-可见光谱(UV-Vis)
Cy5特征吸收峰在646–650 nm,紫杉醇在227–230 nm。
可通过吸光度比值估算标记程度和浓度。
荧光光谱
激发峰约646–650 nm,发射峰约664–670 nm。
光谱强度可反映标记效率及荧光活性,确保可视化功能。
核磁共振(NMR)
1H-NMR可确认紫杉醇核心结构保持完整,羟基或酯基偶联位点形成稳定键。
检查标记后结构是否存在异构或副反应产物。
薄层色谱(TLC)
可快速检查反应完成度及纯化效果。
与未反应紫杉醇或游离Cy5染料对比,观察Rf值差异。
稳定性评估
冻干或低温储存,复溶于有机溶剂或缓冲体系中,荧光信号和结构保持稳定。
避免高温、强光及端pH条件,以维持化学与光学性能。
产品名称:cy5-taxol,cy5标记紫杉醇
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
推荐产品:
IR-1048-Me-Tetrazine
IR1048-NH2
IR-1048-NHS ester
IR-1048-NHS-ester
IR1048-TCO
IR-1048-TCO
IR-1061-Alkyne
仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.06.23