Cyanine5-PEG-Lysozyme，CY5-聚乙二醇-溶菌酶的反应条件控制

CY5-PEG-Lysozyme 是将荧光染料 Cy5 通过聚乙二醇（PEG）连接臂共价修饰于溶菌酶（Lysozyme）表面的产物，其反应步骤设计旨在保留溶菌酶活性、提高水溶性并实现荧光标记。

蛋白准备

• 溶菌酶溶解于适当缓冲体系（如 PBS pH 7.4），去除游离胺、巯基或还原剂，保证偶联位点可用。

• 可使用超滤或透析去除小分子杂质。

PEG 偶联反应

• Cy5-PEG-NHS 或 Cy5-PEG-maleimide 按设定摩尔当量加入溶菌酶溶液中。

• 对于 NHS 酯体系：溶菌酶赖氨酸 ε-NH2 与 NHS 酯发生亲核取代，形成稳定酰胺键。

• 对于 maleimide 体系：溶菌酶巯基与 maleimide 双键发生 Michael 加成，形成稳定硫醚键。

反应条件控制

• 温和条件（4–25°C）反应 1–4 小时，避光以防止 Cy5 光降解。

• pH 7–8 可保证 NHS 酯高效反应，同时保护蛋白构象。

反应终止与杂质去除

• 加入甘氨酸或乙醇胺封闭剩余活性官能团。

• 使用透析、超滤或凝胶过滤去除未反应 PEG、Cy5 及副产物，获得纯净 CY5-PEG-Lysozyme。

表征与验证

• SDS-PAGE（荧光扫描）确认偶联成功及分子量变化。

• UV-Vis 光谱测定 Cy5 吸收峰，评估标记度。

• 活性测定（如微生物裂解实验）验证溶菌酶催化功能保留。

反应特点

• PEG 链提供空间隔离，减少 Cy5 对活性中心干扰。

• 偶联为共价稳固键，反应可控，荧光端远离蛋白核心。

• 可调节 PEG 长度和偶联度，兼顾荧光信号与生物活性。

产品名称：Cyanine5-PEG-Lysozyme，CY5-聚乙二醇-溶菌酶

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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