Cyanine5-PEG-MouseIgG,CY5-聚乙二醇-鼠IgG的偶联原理
CY5-PEG-Mouse IgG 是将荧光染料 Cy5 通过聚乙二醇(PEG)柔性连接臂偶联至鼠源免疫球蛋白 G(Mouse IgG)分子的产物。IgG 分子为 Y 型四级结构,由两条重链和两条轻链构成,具有抗原结合区(Fab)和 Fc 区域。通过 PEG-Cy5 修饰,IgG 可获得可追踪性,同时保持抗体生物活性。
偶联原理
• PEG 链末端带活化官能团(如 N-羟基琥珀酰亚胺 NHS 酯或 maleimide)与 IgG 表面赖氨酸 ε-NH2 或半胱氨酸巯基发生共价反应。
• 在 NHS 酯体系中,赖氨酸氨基作为亲核试剂进攻 NHS 酯碳原子,释放 N-羟基琥珀酰亚胺,形成稳定的酰胺键。
• 在 maleimide 体系中,蛋白自由巯基通过 Michael 加成反应与 maleimide 双键结合,形成稳定的硫醚键。
空间与构象调控
• PEG 链长度(1–5 kDa)提供柔性空间,隔离 Cy5 与 IgG 活性中心,避免 Fab 区抗原结合或 Fc 区受体结合受阻。
• 通过调节 PEG 当量和反应条件,可精确控制标记度(DOL),兼顾荧光信号强度与生物活性。
反应条件
• NHS 酯偶联佳 pH 7–8,温和低温(4–25°C)可保持 IgG 构象稳定。
• Maleimide 反应佳 pH 6.5–7.5,避免巯基氧化或蛋白聚集。
• 反应过程中避光,以防 Cy5 光降解。
反应后处理
• 通过甘氨酸或乙醇胺封闭残余活性基团,防止非特异性偶联。
• 透析、超滤或凝胶过滤去除未反应 PEG、Cy5 及小分子副产物。
特性总结
• 偶联为共价稳固键,Cy5 荧光端远离活性位点,IgG 保持抗原结合能力。
• PEG 提高水溶性、降低非特异性吸附、延长体内循环时间。
产品名称:Cyanine5-PEG-MouseIgG,CY5-聚乙二醇-鼠IgG
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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