荧光聚苯乙烯ps纳米微球标记物的制备方法

a、制备聚苯乙烯纳米微球，并将其和带有活性基团的有机硅烷化学键合，形成表面带有活性基团的微球，具体为每100mLこ醇溶液中加入25g聚こ烯吡咯烷酮、1. 06g过硫酸钾、10g苯こ烯，所述こ醇溶液中こ醇与水的体积为3:1，将配置好的每100mLこ醇溶液溶解后置于超声波反应器中，通氮气排除体系中的氧气，开启超声波发生器进行聚合反应，得到聚苯こ烯纳米微球分散液，离心搜集聚苯こ烯纳米微球，以5mL无水こ醇悬浮，加入5μ L氨基硅烷，搅拌反应 I小吋，以等体积无水こ醇洗涤后收集；

b、将荧光络合物以化学键合掺杂于上述微球中，得到带有荧光络合物的微球，之后再以带有活性基团的有机硅在微球表面引入活性基团，具体为将lmg/mL的BCPDA按等体积加入到氨基化纳米微球悬浮液中,搅拌15min,离心收集，悬浮于50mmol/L的pH=7. 8磷酸盐缓冲液中，加入等体积O. lmol/L的EuCl3溶液，避光搅拌反应IOmin ;离心收集后悬浮于等体积无水こ醇溶液中，加入5 μ L氨基硅烷，搅拌反应I小吋，以等体积无水こ醇洗涤后收集，即得到稀土荧光微球标记物。

实施方法的原理：

将聚こ烯吡咯烷酮(PVP)、过硫酸钾(KPS)、苯こ烯(St)加入到こ醇/水介质中溶解后置于超声波反应器中，在氮气的保护下聚合反应。反应过程中維持反应温度为60°c。反应一段时间后得到聚苯こ烯纳米微球分散液。利用带有活性基团的有机硅烷在ニ氧化硅微球引入活性基团，再将荧光物质通过化学键合的形式固定于ニ氧化硅微球的表面，而后在微球表面以带有活性基团的有机硅烷再次引入活性基团。

制备FITC荧光微球标记物异硫氰酸荧光素(FITC)是ー种常用荧光素，在波长为490nm的激发光作用下，发出波长为520nm的荧光，呈现明亮的黄緑色。FITC的水溶性和醇溶性良好，其自身带有异硫氰酸基，可以与氨基发生反应，形成共价键。利用苯こ烯制备等材料制备聚苯こ烯纳米微球内核，以氨基娃烧在微球表面弓I入氨基，可将FITC标记于微球表面,制得突光纳米微球。

（1）制备氨基化纳米微球将25gPVP、0. 06gKPS，10gSt加入到IOOmLこ醇/水(体积为3:1)介质中溶解后置于超声波反应器中，通氮气排除体系中的氧气，开启超声波发生器进行聚合反应。反应过程中通循环水維持的反应温度为60°C，且保持恒定的功率300W和恒定的氮气流速。反应一段时间后得到聚苯こ烯纳米微球分散液。离心搜集聚苯こ烯纳米微球，以5mL无水こ醇悬浮,加入5 μ L氨基娃烧,室温搅拌反应I小吋，以等体积无水こ醇洗涤后收集。

（2）制备稀土荧光纳米微球将FITC配制成lmg/mL的こ醇溶液，按等体积加入到氨基化纳米微球悬浮液中，室温避搅拌15min，离心收集，离心收集后悬浮于等体积无水こ醇溶液中，加入5 μ L氨基硅烷，室温搅拌反应I小吋，以等体积无水こ醇洗涤后收集，即得到稳定的FITC荧光微球标记物。

齐岳提供聚苯乙烯微球试剂列表：

乳胶聚苯乙烯微球    

聚苯乙烯乳胶微球    

带负电聚苯乙烯微球    

红色荧灯光聚苯乙烯微球    

径聚苯乙烯微球    

微塑料颗粒/PS微球    

纳米级单分散聚苯乙烯微球    

亚微米级聚苯乙烯微球    

氯甲基化聚苯乙烯微球/氯球    

羧基化的聚苯乙烯微球活化偶联抗体或适配体    

聚苯乙烯-二乙烯基苯微球    

聚苯乙烯微球AMCPS    

聚苯乙烯交联微球    

微米交联聚苯乙烯微球    

环氧基聚苯乙烯磁性微球Epoxy/ps    

环氧基修饰聚苯乙烯磁性微球    

环氧基标记聚苯乙烯磁性微球    

聚苯乙烯磁性微球耦联环氧基    

聚苯乙烯磁性微球标识环氧基    

单分散聚苯乙烯PS微球    

PS聚苯乙烯单分散微球    

氨基聚苯乙烯磁性微球NH2/ps    

NH2/ps氨基修饰聚苯乙烯磁性微球    

氨基标记聚苯乙烯磁性微球    

聚苯乙烯磁性微球耦联氨基    

聚苯乙烯磁性微球标识氨基    

硅醇基聚苯乙烯磁性微球SiOH/ps    

聚苯乙烯修饰/偶联/标记硅醇基磁性微球    

单分散聚苯乙烯荧光微球    

荧光聚苯乙烯单分散微球    

绿色聚苯乙烯荧光微球    

红色色聚苯乙烯荧光微球    

橙色聚苯乙烯荧光微球    

苯肼基修饰的聚苯乙烯微球    

磺酸基修饰的聚苯乙烯微球    

聚苯乙烯荧光微球（FITC or RB）红色 橙色 绿色    

BSA/蛋白连接聚苯乙烯    

氨基羧基功能化聚苯乙烯微球(PS微球)     

小编：wyf  06.22