CY7.5-Amyloid β-Peptide，1-42，human，CY7.5-β-淀粉样多肽，1-42的合成路线

CY7.5-Aβ(1-42)是将人源β-淀粉样肽Aβ1-42（序列DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA）与近红外花菁染料Cy7.5共轭得到的荧光肽探针。Aβ1-42富疏水并易自聚，近C端包含IIGLMVGGVVIA的跨膜样段，溶解与构象对标记位点高度敏感。Cy7.5在约780–790 nm激发、800–820 nm发射，摩尔消光系数通常≥2×10^5 M⁻¹·cm⁻¹，能在复杂背景中提供低自发荧光干扰的远红外信号。常见单位点标记策略包括：①N端α-氨基与Cy7.5-NHS酯偶联；②在N端前引入柔性接头（β-Ala、AEEA或PEG_n）以降低染料对折叠/聚集的扰动；③在肽序列两端外加Lys(Mtt/ivDde)或Cys作为位点选择性标记手柄。纯化后产物以TFA盐或醋酸盐形式冻干保存，避光、-20 °C干燥条件下稳定。典型表征采用RP-HPLC（C18，梯度洗脱）、MALDI-TOF/ESI-MS确认分子量，UV-Vis/荧光测定染料谱图与标记度（DOL≈0.8–1.0），并以SDS-PAGE或HP-SEC评估聚集与纯度。

合成路线：

1）固相合成肽链（SPPS）： 采用Fmoc策略于Rink amide或Wang树脂上自C端至N端逐步延伸；对酸性/碱性位点使用标准侧链保护（Asp/OtBu，Glu/OtBu，Lys(Boc)，His(Trt)，Tyr(tBu)，Ser/Thr(tBu)等）。若计划位点特异标记，于N端前加β-Ala或AEEA接头，或额外加Lys(Mtt/ivDde)或Cys(Trt)并保留正交保护。每步偶联用HBTU/HATU+DIEA或DIC/Oxyma体系，难偶联位点可双耦或延长反应。

2）树脂裂解与初纯： 用TFA/水/三异丙基硅烷（95:2.5:2.5）裂解2–3 h，冷乙醚沉淀粗肽，RP-HPLC初步纯化，得到去保护Aβ1-42或含正交保护的前体。

3A）NHS酯胺化标记（N端）： 将肽溶于无水DMSO/水/0.1 M碳酸氢盐缓冲（pH 8.3）或HEPES（pH 8.2），低浓度（≤50 µM）并加入0.01–0.05%去垢剂（如Tween-20）或少量HFIP以抑制聚集；Cy7.5-NHS溶于DMSO，按1.1–1.5当量滴加，室温避光反应0.5–2 h。终止后以RP-HPLC分离单标记峰，收集并冻干。

3B）Maleimide-巯基加成（位点特异）： 若引入N端或侧链Cys，先用TCEP温和还原，pH 6.5–7.0条件下与Cy7.5-Maleimide 1.2当量反应30–60 min，避免胺侧反应；随后RP-HPLC纯化。

3C）Lys选择性标记（正交保护）： 先在溶液中去除Lys(ivDde)（5%肼/DMF多次短洗），其余保护保持；随后进行Cy7.5-NHS偶联，完成后再全去保护/纯化。

4）表征与配方： 通过MS核对准确质量，UV-Vis计算DOL并核验染料谱位移；采用PBS或HBS含0.01%去垢剂、1–5%甘油/蔗糖成剂型，避免冻融；长期避光-20 °C储存。必要时进行尺寸/聚集评价（DLS/SEC-HPLC），确保批间一致性。

产品名称：CY7.5-Amyloid β-Peptide，1-42，human

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.06.23