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RB-PEG5000-Biotin,罗丹明聚乙二醇生物素
发布时间:2025-08-29     作者:HLL   分享到:

产品名称:罗丹明聚乙二醇生物素

英文名称:RB-PEG5000-Biotin

RB-PEG5000-Biotin(罗丹明聚乙二醇生物素)是一类由罗丹明(RB)荧光染料、聚乙二醇(PEG,分子量约 5000 Da)与生物素(Biotin)分子通过化学偶联形成的多功能生物探针,其核心设计理念在于整合罗丹明的荧光示踪能力、PEG 的生物相容性及生物素与链霉亲和素(Streptavidin,SA)/ 亲和素(Avidin)的特异性相互作用,构建 “荧光标记 - 靶向结合 - 信号放大” 的一体化工具,在生物医学研究、体外诊断及药物递送领域具有广泛且不可替代的应用。


罗丹明(RB)作为该探针的荧光报告单元,其光学性能经过长期实践验证,是生物成像领域的成熟选择。RB-PEG5000-Biotin 中常用的罗丹明衍生物为罗丹明 B,其光物理特性高度适配生物样本的荧光检测需求:最大吸收波长约 550-555 nm,最大发射波长约 570-575 nm,处于橙红色光区,该波段光线在生物组织中的散射系数低于 shorter wavelength 光线(如绿色光、蓝色光),穿透深度可达 100-200 μm,适用于厚组织切片(如肿瘤组织、脑组织切片)或活体浅层成像;摩尔消光系数高达 1.2×10⁵-1.4×10⁵ L・mol⁻¹・cm⁻¹,荧光量子产率在水溶液中约为 0.35-0.45,即使在低浓度(nM 级)下也能产生强荧光信号,满足微量生物分子(如低丰度蛋白质、核酸)的检测需求。此外,罗丹明具有良好的光稳定性 —— 在激光共聚焦显微镜(543 nm 激发)连续扫描 50 次后,荧光强度保留率约为 60%,高于荧光素(FITC,约 40%),可支持长时间动态观测(如细胞迁移、分子相互作用的实时追踪);其荧光信号对 pH 变化的耐受性较强,在 pH 5.0-9.0 范围内,荧光强度波动小于 15%,避免了细胞内酸性细胞器(如溶酶体)或碱性环境对检测结果的干扰,确保成像数据的准确性。


聚乙二醇(PEG,分子量 5000 Da)在 RB-PEG5000-Biotin 中承担 “生物相容性增强剂”“空间位阻调节剂” 与 “溶解性优化剂” 的三重角色,其分子量选择是基于应用场景的精准平衡。从生物相容性角度看,5000 Da 的 PEG 链是生物医用领域的 “优选分子量”,已广泛应用于 PEG 化药物(如 PEG 化重组人促红细胞生成素),其分子链上大量的醚键(-O-)可与水分子形成密集的水化层,有效隔绝探针分子与生物体系中的蛋白质(如血清白蛋白、免疫细胞表面受体)、细胞的非特异性相互作用 —— 实验数据显示,在含 20% 胎牛血清的细胞培养液中,RB-PEG5000-Biotin 的非特异性吸附率仅为未修饰罗丹明 - 生物素探针的 12%,这在细胞成像与体外诊断实验中可显著降低背景信号,提升检测的信噪比;在体内应用中,水化层能减少单核巨噬细胞对探针的吞噬,延长其血液循环半衰期(小鼠尾静脉注射后,半衰期约为 5.5 小时,比 PEG3400 修饰探针长约 1.5 小时),为探针与靶标分子的充分结合提供充足时间。从空间位阻调节来看,5000 Da 的 PEG 链具有适度的长度与柔性,在探针与链霉亲和素结合时,可避免罗丹明荧光团与生物素活性位点的空间冲突,确保生物素与链霉亲和素的高亲和力结合;同时,在探针标记生物分子(如抗体、纳米载体)后,PEG 链可减少生物分子的聚集,保留其生物活性(如抗体的抗原结合活性、酶的催化活性)。从溶解性优化来看,PEG 的高水溶性可有效改善罗丹明与生物素的疏水性,使 RB-PEG5000-Biotin 在水、PBS 缓冲液、细胞培养液等极性溶剂中的溶解度可达 15 mg/mL 以上,且溶液澄清无团聚(通过动态光散射仪检测,粒径分布均一,无明显聚集峰),避免了疏水性导致的荧光猝灭,确保荧光信号的稳定性。


生物素(Biotin)分子是 RB-PEG5000-Biotin 实现特异性靶向结合的核心,其与链霉亲和素 / 亲和素的相互作用是生物医学领域 “最强非共价相互作用” 之一,这一特性决定了探针的靶向能力与应用价值。生物素(又称维生素 H)是一种小分子有机化合物(分子量约 244 Da),其与链霉亲和素(一种源自链霉菌的四聚体蛋白质)的结合具有三大无可比拟的优势:一是亲和力极高,解离常数(Kd)约为 10⁻¹⁵ M,比抗原 - 抗体相互作用(Kd 约 10⁻⁷-10⁻¹¹ M)强 10⁴-10⁸倍,结合稳定性远超多数生物分子相互作用,可在复杂生物环境(如血清、组织匀浆)中保持稳定结合,不易解离;二是特异性极强,生物素仅与链霉亲和素 / 亲和素发生特异性结合,不与其他生物分子(如蛋白质、核酸、脂质)作用,避免非特异性结合导致的背景干扰;三是结合速度快,反应速率常数约为 10⁶ L・mol⁻¹・s⁻¹,在生理条件下可在几分钟内完成结合,满足快速检测与成像的需求。此外,链霉亲和素为四聚体结构,每个亚基可结合一个生物素分子,这一特性使 RB-PEG5000-Biotin 可通过 “生物素 - 链霉亲和素” 系统实现信号放大 —— 例如,在检测低丰度靶标分子时,先将靶标分子与生物素化抗体结合,再加入 RB-PEG5000-Biotin 与链霉亲和素的复合物,每个链霉亲和素可结合 4 个 RB-PEG5000-Biotin 分子,从而将荧光信号放大 4 倍,显著提升检测灵敏度。


在应用场景中,RB-PEG5000-Biotin 的优势充分体现在 “荧光示踪” 与 “特异性结合” 的协同作用上。在细胞生物学研究中,其可通过 “生物素 - 链霉亲和素” 系统实现细胞表面或细胞内靶标分子的精准标记与成像 —— 例如,将链霉亲和素修饰在细胞膜表面的特定受体上,再加入 RB-PEG5000-Biotin,通过荧光成像追踪受体的动态分布与内化过程;也可用于细胞骨架(如微管、肌动蛋白)的荧光标记,通过 “生物素化抗体 - 链霉亲和素 - RB-PEG5000-Biotin” 的三明治结构,实现细胞骨架的清晰成像,研究细胞分裂、迁移过程中骨架的动态变化。在体外诊断领域,其是构建高灵敏度荧光检测试剂盒的核心组件,可用于肿瘤标志物(如 PSA、CA15-3)、病原体(如流感病毒、幽门螺杆菌)的检测 —— 以肿瘤标志物检测为例,试剂盒中预先固定生物素化的捕获抗体,样本中的肿瘤标志物与捕获抗体结合后,加入链霉亲和素与 RB-PEG5000-Biotin 的复合物,通过检测荧光强度即可定量分析肿瘤标志物的浓度,由于 “生物素 - 链霉亲和素” 的信号放大作用,该检测方法的灵敏度可比传统 ELISA 高 10-100 倍,可实现早期肿瘤的精准诊断。在药物递送领域,其可用于靶向药物载体的荧光示踪与靶向性评估 —— 例如,将生物素修饰在脂质体或聚合物纳米粒表面,RB-PEG5000-Biotin 通过与载体表面的生物素结合(或通过链霉亲和素桥接)实现荧光标记,再利用肿瘤细胞表面高表达的生物素受体(如某些乳腺癌细胞),实现药物载体的靶向递送,同时通过荧光成像追踪载体在体内的分布与肿瘤组织的富集效率,为药物载体的优化提供依据。此外,在蛋白质组学研究中,其可用于蛋白质的分离与鉴定 —— 将 RB-PEG5000-Biotin 与目标蛋白质结合,通过链霉亲和素亲和柱实现蛋白质的特异性捕获,再通过荧光检测与质谱分析,实现低丰度蛋白质的高效分离与鉴定。


在储存与使用过程中,需针对 RB-PEG5000-Biotin 的荧光稳定性、生物素活性及 PEG 特性制定严格规范。由于罗丹明对强光敏感,长期暴露于日光或紫外光下会导致荧光猝灭,因此需将探针(通常为白色或浅橙色冻干粉末)避光储存于 - 20℃冰箱,且避免反复冻融(建议分装为 100 μg / 支的小剂量,单次使用);生物素分子虽稳定性较高,但 PEG 链在高温或高湿度环境下易发生氧化,因此冻干粉末需在干燥、低温环境下储存(相对湿度 <30%),使用前需用无水、无生物素的溶剂(如超纯水、不含生物素的 PBS 缓冲液)溶解,且溶解后应在 2 小时内使用,防止 PEG 链氧化影响生物相容性。在实验操作中,若涉及 “生物素 - 链霉亲和素” 结合反应,需控制两者的摩尔比(通常生物素与链霉亲和素的摩尔比为 4:1-5:1,确保链霉亲和素的四个结合位点充分饱和);反应体系需避免使用含生物素的试剂(如某些含生物素的细胞培养液),防止外源性生物素与探针竞争结合链霉亲和素,影响结合效率。在细胞成像实验中,标记后的细胞需用 PBS 洗涤 3-5 次(每次 5 分钟),去除细胞表面未结合的游离探针,确保成像信号来自特异性结合的靶标分子;对于体内成像实验,需通过预实验确定最佳给药剂量(通常为 0.2-0.5 mg/kg),利用 PEG 修饰的低免疫原性优势,减少探针在体内的免疫清除,同时避免过量给药导致的肝脏、脾脏蓄积。此外,在与链霉亲和素偶联前,需通过凝胶过滤层析(如 Sephadex G-50 柱)去除探针中的小分子杂质(如未反应的生物素单体),避免杂质与链霉亲和素结合,影响偶联效率。

产地:西安

规格:50mg 100mg 500mg

纯度:95%

状态:固体/粉末

储藏条件:冷藏

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发,生产,销售为一体的高科技企业,可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等,可以满足不同客户的定制需求。

RB-PEG5000-Biotin

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小编:HLL 2025年8月27日

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