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CY7.5-Protamine,CY7.5标记精蛋白的合成过程研究
发布时间:2025-08-29     作者:axc   分享到:

CY7.5-Protamine,CY7.5标记精蛋白的合成过程研究

CY7.5-Protamine 是由近红外染料CY7.5与精蛋白(protamine)分子偶联得到的一类荧光大分子。精蛋白是一种小分子蛋白质,富含精氨酸残基,带有高度正电荷,通常用于核酸结合和药物递送系统研究。将CY7.5与精蛋白偶联后,不仅赋予其可视化能力,还能在分子层面研究蛋白质-核酸相互作用。CY7.5-Protamine的合成过程涉及多位点反应、修饰程度控制及复杂的纯化表征,因此常作为化学修饰研究的重要案例。

其合成过程研究可分为以下几个方面:

首先是 反应设计。精蛋白分子含有大量精氨酸和少量赖氨酸残基,其中赖氨酸侧链ε-氨基和蛋白质N-端氨基均可作为偶联反应位点。为了实现高效荧光标记,常采用 CY7.5-NHS ester,利用其活泼的酯基与氨基形成稳定的酰胺键。由于精蛋白氨基位点较多,反应过程中需通过调控摩尔比、反应时间和缓冲条件来控制标记度,以避免过度修饰影响蛋白质的结构与功能。

其次是 合成条件的优化。通常将精蛋白溶于弱碱性缓冲液(如pH 8.3的碳酸盐缓冲液),在温和条件下缓慢加入CY7.5-NHS溶液(溶于DMSO)。通过逐滴加入和低温搅拌,可以减少局部高浓度导致的过度修饰。研究表明,当染料与蛋白质摩尔比控制在2:1至5:1时,能够获得良好的标记效率与荧光性能。

第三是 反应完成后的纯化。由于精蛋白分子量较低,常采用 透析(MWCO 3–10 kDa) 或 凝胶过滤层析 去除未结合的自由染料。对于高要求的研究,可进一步通过反相HPLC或离子交换色谱进行分离,以确保获得均一化的CY7.5-Protamine样品。

第四是 表征研究。荧光光谱和紫外-可见光谱用于确认CY7.5的吸收与发射特性是否保持不变;MALDI-TOF质谱或LC-MS可检测修饰程度,揭示平均每个蛋白分子上偶联的染料数目(标记度);SDS-PAGE结合荧光成像可快速确认偶联是否成功;圆二色谱(CD)和动态光散射(DLS)用于研究修饰后蛋白质的构象与聚集特性,确保CY7.5标记不会破坏蛋白质的二级结构和核酸结合能力。

此外,研究还涉及 标记位置的可控性。由于CY7.5偶联主要通过赖氨酸氨基,若需要更精准的标记位点,可采用化学改造策略,例如选择性修饰N端或引入额外的功能基团(如叠氮、炔基),再通过点击化学进行定点标记。这类研究使得CY7.5-Protamine不仅在成像应用上具有意义,还在蛋白质化学与修饰机制研究中提供了重要参考。

产品名称:CY7.5-Protamine,CY7.5标记精蛋白

纯度:95%+

性状:固体或液体

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家:齐岳生物

CY7.5-Protamine

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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