Cy7.5-Inulin,CY7.5标记菊粉的反应机理
CY7.5-Inulin 是以多糖菊粉(Inulin)为载体,通过与近红外染料 CY7.5 进行化学偶联制备的荧光标记多糖。菊粉是一种由 β-(2→1) 果糖聚合物组成的水溶性膳食纤维,具有良好的生物相容性与低免疫原性。将 CY7.5 偶联至菊粉骨架后,不仅赋予了其近红外荧光成像功能,还使得其在药物递送与分子探针领域具有更高应用潜力。
合成思路主要基于菊粉分子中的羟基作为反应位点,通过在菊粉表面引入氨基或羧基修饰后,再与 CY7.5 的活性酯形式发生酰胺化或酯化反应实现荧光标记。常见方法为:首先利用氯乙酸或对甲苯磺酰氯对菊粉羟基进行活化,引入 –COOH 或 –NH2 功能基团,得到可与 CY7.5 反应的中间体。随后在弱碱性条件下(pH 8.5,PBS 缓冲液)将 CY7.5-NHS ester 与改性菊粉混合,缓慢搅拌反应 12–24 小时。由于 CY7.5-NHS ester 对水敏感,通常需在 DMSO 或 DMF 中预先溶解后再缓慢滴加。
反应机理为典型的酰胺键偶联反应:菊粉修饰的氨基对 CY7.5-NHS ester 的羰基进行亲核攻击,形成四面体中间体并释放 NHS,生成稳定的 –CONH– 连接键。通过调节 CY7.5 与菊粉的摩尔比,可以控制荧光修饰密度,避免过度标记造成荧光淬灭或溶解性下降。
纯化过程通常采用透析袋(MWCO 3,500–10,000 Da)对反应混合物进行长时间透析,去除未反应的游离染料与小分子杂质。透析液需每日更换,直至透析外液不再检测到吸收峰。随后将产物溶液冻干,得到 CY7.5-Inulin 的深蓝色粉末。
表征方法包括:
UV-Vis 吸收光谱(780 nm 峰验证 CY7.5 引入),
荧光发射光谱(810 nm 发射峰),
傅里叶红外光谱(FTIR)(检测酰胺键的 C=O 吸收),
凝胶渗透色谱(GPC)(检测分子量分布变化),
元素分析与 ^1H NMR(验证菊粉骨架保留及染料修饰信号)。
终产物兼具菊粉的高水溶性与 CY7.5 的强近红外荧光特性,可用于生物成像、药物递送载体标记、糖-受体相互作用研究等。
产品名称:Cy7.5-Inulin,CY7.5标记菊粉
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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