CY7.5-TPP,CY7.5标记磷酸三苯酯的反应机制
CY7.5-TPP 是将磷酸三苯酯(Triphenylphosphonium, TPP)与近红外荧光染料 CY7.5 偶联形成的功能化分子,主要用于细胞线粒体靶向及生物成像研究。TPP 是典型的阳离子脂溶性分子,其四苯基基团赋予高疏水性,而正电荷促进跨膜累积。CY7.5 的近红外荧光特性使得标记分子能够在体内实现可视化追踪。
反应机制主要包括以下环节:
活性官能团准备
CY7.5 通常以 NHS 酯或羧酸活化形式存在,通过 NHS 酯化处理可生成高反应活性的中间体。TPP 分子通常在其末端引入含氨基或羟基的链段,使其能够与 CY7.5-NHS ester 或通过碳酸酯中间体进行共价偶联。
亲核加成反应
偶联过程中,TPP 的氨基或羟基作为亲核试剂,攻击 CY7.5 活化羧基碳原子,形成稳定的酰胺键或碳酸酯键。该过程通常在缓冲体系中进行,pH 控制在弱碱性(pH 7.5–8.5)以增强亲核性,同时避免染料或 TPP 基团发生水解或氧化。
偶联选择性与位置控制
由于 CY7.5-NHS ester 具有较高的反应活性,偶联反应主要发生在 TPP 末端的可用氨基或羟基上,避免影响 TPP 的正电荷核心和疏水基团。该设计确保了标记分子在细胞膜或线粒体膜上的靶向能力,同时保持染料的光学性能。
产物稳定性
形成的 CY7.5-TPP 分子中,酰胺键和碳酸酯键化学稳定,可耐受水相和缓冲液条件下的温和处理,同时保持荧光染料的近红外发射特性。疏水性和阳离子特性使分子能够在细胞膜上高效穿透并富集于线粒体,保证靶向性能。
反应优化与纯化
偶联反应可通过摩尔比调控标记度,并通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱(HPLC)去除未反应的 CY7.5 或 TPP 分子。反应条件优化确保高得率与结构均一性,同时保持 CY7.5-TPP 的光学和生物学活性。
综上,CY7.5-TPP 的反应机制体现为活性羧基中间体激活、TPP 末端亲核加成、位点选择性偶联、产物稳定性保障及纯化优化。该机制确保了分子在保持线粒体靶向特性和荧光性能的同时,适用于体内及体外成像研究。
产品名称:CY7.5-TPP,CY7.5标记磷酸三苯酯
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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