产品名称:DSPE-PEG-GCRGDCSWM2000,磷脂-聚乙二醇-GCRGDCS多肽序列的合成方法
合成方法
1. DSPE-PEG 的活化
试剂:使用 DSPE-PEG-马来酰亚胺(Mal) 或 DSPE-PEG-NHS 酯 作为活化中间体。
反应条件:
将 DSPE-PEG-Mal 或 DSPE-PEG-NHS 溶解于无水 DMSO 或 DMF 中(浓度 5-10 mg/mL),氮气保护下避免水解。
2. 多肽 GCRGDCSWM2000 的修饰与偶联
多肽合成:
采用固相合成法(如 Fmoc 策略)逐步添加氨基酸,确保序列准确性。
引入半胱氨酸(C)或氨基,便于后续偶联反应。
偶联反应:
反应原理:DSPE-PEG-Mal 的马来酰亚胺基团与多肽的巯基(-SH)或氨基发生加成反应,形成稳定的硫醚键或酰胺键。
操作步骤:
将多肽溶于 PBS 缓冲液(pH 7.2-7.4),加入还原剂(如 TCEP)保持反应基团活性。
缓慢将多肽溶液滴加至 DSPE-PEG-Mal 溶液中,摩尔比控制为 1.2-1.5:1(多肽:DSPE-PEG-Mal)。
室温下反应 4-6 小时,通过 HPLC 或 MS 监测反应进程。
反应完成后,通过透析或超滤去除未反应的多肽和副产物。
3. 最终产物的纯化与表征
纯化方法:
使用透析袋(MWCO 3.5 kDa)去除未反应的小分子,或通过超滤离心管(10 kDa 截留分子量)浓缩产物。
表征手段:
核磁共振(NMR):确认多肽与 DSPE-PEG 的连接位置及结构完整性。
质谱(MS):验证分子量及偶联效率。
凝胶渗透色谱(GPC):分析产物的分子量分布及纯度。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
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