产品名称:DSPE-PEG-FYPSYHSTPQRP,二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-多肽FYPSYHSTPQRP的合成方法
合成方法
1. DSPE-PEG的活化
试剂:使用DSPE-PEG-马来酰亚胺(Mal)或DSPE-PEG-NHS酯作为活化中间体。
反应条件:
将DSPE-PEG-Mal或DSPE-PEG-NHS溶解于无水DMSO或DMF中(浓度5-10 mg/mL),氮气保护下避免水解。
2. FSHB多肽的修饰与偶联
多肽合成:
采用固相合成法(如Fmoc策略)逐步添加氨基酸,确保序列准确性。
引入半胱氨酸(C)以提供巯基(-SH),便于后续偶联反应。
偶联反应:
反应原理:DSPE-PEG-Mal的马来酰亚胺基团与多肽的巯基(-SH)发生加成反应,形成稳定的硫醚键。
操作步骤:
将多肽溶于PBS缓冲液(pH 7.2-7.4),加入还原剂(如TCEP)保持巯基活性。
缓慢将多肽溶液滴加至DSPE-PEG-Mal溶液中,摩尔比控制为1.2-1.5:1(多肽:DSPE-PEG-Mal)。
室温下反应4-6小时,通过HPLC或MS监测反应进程。
反应完成后,通过透析或超滤去除未反应的多肽和副产物。
3. 最终产物的纯化与表征
纯化方法:
使用透析袋(MWCO 3.5 kDa)去除未反应的小分子,或通过超滤离心管(10 kDa截留分子量)浓缩产物。
表征手段:
核磁共振(NMR):确认多肽与DSPE-PEG的连接位置及结构完整性。
质谱(MS):验证分子量及偶联效率。
凝胶渗透色谱(GPC):分析产物的分子量分布及纯度。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
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