CY7-mannose，CY7甘露糖的表征方法

CY7-mannose（CY7-甘露糖）是将近红外染料Cyanine7与甘露糖通过化学连接臂偶联得到的糖-染料偶联物，兼具CY7的近红外光学特性与甘露糖的识别功能，常用于甘露受体介导的细胞摄取研究、糖-蛋白相互作用与生物成像研究。合成通常选择既保留甘露糖末端还原性位点又便于水相反应的策略，比如“还原性末端-胺化”或“点击化学”两条主路线。

路线A（还原性末端-胺化 + 酰化）：先将D-甘露糖用短链胺-PEG（如 NH2-PEGn-OH）在温和酸性或中性条件下进行还原性胺化（NaBH3CN 作为还原剂，pH 5.0–6.0，室温至37 ℃，数小时），生成甘露糖-PEG-NH2 中间体；随后在无水或水/有机混合溶剂中用 CY7-NHS（或 CY7-活化酯）与甘露糖-PEG-NH2 反应（pH 7.5–8.5，室温，30–120 min，避光），形成稳定的酰胺键，得到CY7-PEG-mannose。该法位点选择性高、条件温和，适合水相生物分子。

路线B（糖基化-炔/叠氮 + CuAAC/SPAAC 点击）：先将甘露糖引入功能化末端（例如合成 propargyl-mannose 或 azido-mannose），可通过糖的醇羟基与碳酸二亚胺或 p-Nitrophenyl carbonate 形成碳酸酯连接到短PEG-链并引入炔基/叠氮；随后用 CY7-azide（或 CY7-alkyne）在水相或水/有机混合溶剂中以 CuAAC（使用少量 Cu(I)/催化剂与配体）或更温和的 SPAAC（CY7-DBCO 与 azido-mannose，无铜）条件下进行点击反应，生成连接牢固的三唑或 SPAAC 加成产物。此法位点可控、产物纯度高，但若用铜催化需后续严格除铜。

纯化流程：反应完成后先用乙腈或甲醇稀释并离心去除沉淀，随后采用透析（MWCO 1–3 kDa 视PEG长度）或超滤（Amicon）去除小分子杂质与游离染料；若产物较小或需要高度纯化，则采用反相高效液相色谱（RP-HPLC，C18柱，乙腈-水梯度，含0.1%甲酸或三氟乙酸）分离，利用750 nm处的近红外吸收峰与254/280 nm处的糖或PEG吸收进行双重检测并收集目标峰。对较大分子量的甘露糖载体，可用凝胶渗透色谱（SEC）或Sephadex G-25/G-50进行分离，并用透射检测与荧光检测共同确认。

表征方法：记录紫外-可见光谱（CY7 在约740–760 nm 处吸收）与荧光光谱（发射约770–790 nm），并据此计算染料/糖的标记度（DOL）；用ESI-MS 或MALDI-TOF 验证分子量；^1H NMR 和 ^13C NMR（对小分子片段或中间体）确认化学键形成；分析型HPLC 确认纯度（>95% 为佳）；对含PEG或寡聚糖的产物，DLS 可检测水合粒径与单分散性。若用于细胞实验，建议测试水溶性、稳定性（不同pH、血清存在下的荧光保持）及受体结合活性（竞争结合或细胞摄取试验）。

储存与注意事项：分装避光，-20 ℃ 或 4 ℃（短期）保存，溶液中可加少量剂（如 0.01% NaN3 不建议用于细胞实验）并避免反复冻融；合成中全程避光、低温操作可提高产率与染料稳定性。总体上，CY7-mannose 的合成兼顾了化学稳定性与生物相容性，通过选择合适的连接臂与纯化策略，可获得高纯度、功能明确的甘露糖近红外探针，便于后续配体-受体相互作用与成像研究。

产品名称：CY7-mannose，CY7甘露糖

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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