CY7-Ricin-Toxin，CY7标记蓖麻毒素的制备方法

CY7-Ricin Toxin是一种通过化学偶联将近红外荧光染料Cyanine7（CY7）与蓖麻毒素（Ricin）构建的功能性生物分子。蓖麻毒素是一种高毒性的二聚蛋白，由A链（RTA, 核糖核酸内切酶活性）和B链（RTB, 结合糖受体）组成，分子量约为60 kDa。通过与CY7的偶联，蓖麻毒素获得了近红外荧光特性（吸收约750 nm，发射约770–790 nm），能够在体外实验中进行分布追踪、受体结合及细胞摄取研究，同时维持蛋白的结构特性。

制备方法：

蛋白准备与缓冲选择

蓖麻毒素在制备前需溶解于生理缓冲液（如PBS）或轻微碱性缓冲液（pH 7–8），保持蛋白结构稳定。缓冲液中可添加少量去污剂或稳定剂防止蛋白聚集，同时避免含硫或胺基强烈活化剂，以免影响后续偶联反应。

CY7活化

常用CY7衍生物包括CY7-NHS酯或CY7-MAL。NHS酯通过与蛋白赖氨酸氨基形成稳定酰胺键，MAL通过与蛋白巯基形成稳定硫醚键。在偶联前，CY7衍生物需溶解于适宜溶剂（如DMSO或DMF），确保活化功能完整。

偶联反应

将活化CY7缓慢加入蓖麻毒素溶液中，反应温度通常控制在4°C至室温，反应时间为数小时至过夜，以保证充分偶联且不破坏蛋白结构。反应过程中保持轻柔搅拌，避免蛋白聚集或变性。偶联比例需优化，以保证足够的荧光标记而不影响毒素活性或糖结合功能。

保护与选择性偶联

若蛋白中含有多个活性位点，可通过保护策略选择性修饰特定位点，避免干扰A链或B链的功能区域。某些制备方案可先轻微还原蛋白巯基，再与CY7-MAL选择性反应，实现可控偶联。

纯化与表征

偶联产物通过凝胶过滤、透析或高效液相色谱（HPLC）纯化，去除未偶联染料及副产物。纯化后的CY7-Ricin可通过UV-Vis光谱和荧光光谱确认CY7吸收和发射特性，质谱（ESI-MS）或SDS-PAGE分析蛋白分子量及偶联效率，同时检测A链和B链完整性。

功能验证

制备完成的CY7-Ricin可用于细胞摄取实验、受体结合研究及体外示踪。近红外荧光便于低背景成像，评估毒素在细胞膜和胞内的分布，同时检测偶联过程中蛋白功能保留情况。

总结

CY7-Ricin通过化学偶联整合了蓖麻毒素的生物活性与CY7的近红外荧光特性，实现了示踪与功能分析的双重优势。其制备方法包括蛋白预处理、CY7活化、温和偶联、纯化及功能验证，保证蛋白结构完整、偶联稳定、荧光性能良好。CY7-Ricin可用于体外分布研究、受体结合分析及细胞摄取示踪，为生物学研究提供重要工具，同时为毒素相关机制研究及纳米递送系统探索提供可靠手段。

产品名称：CY7-Ricin-Toxin，CY7标记蓖麻毒素

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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