CY7-Myoglobin，MYO，Mb，CY7标记肌红蛋白的合成步骤

CY7标记肌红蛋白（Myoglobin, Mb）是将近红外荧光染料Cyanine7与肌红蛋白分子共价结合形成的标记蛋白，用于分子追踪和荧光成像。肌红蛋白是一种含血红素的氧结合蛋白，分子量约17 kDa，存在于心肌和骨骼肌细胞中。标记后保持蛋白活性和氧结合功能，同时赋予近红外荧光特性，为体外和体内研究提供可视化工具。

合成步骤如下：

蛋白准备

将纯化的肌红蛋白溶解在适宜缓冲液中（如PBS，pH 7.2–7.4），浓度通常在1–10 mg/mL。确保蛋白无聚集，必要时进行轻度过滤或离心去除微颗粒杂质，以保证偶联反应均一进行。

选择CY7标记试剂

常用CY7衍生物包括CY7-NHS酯（与蛋白赖氨酸残基偶联）或CY7-马来酰亚胺酯（与半胱氨酸残基偶联）。肌红蛋白含有暴露的赖氨酸残基和一个自由半胱氨酸（Cys110），可根据实验需求选择偶联位点。

偶联反应

NHS酯偶联：将CY7-NHS酯溶解在少量DMSO或DMF中，缓慢加入肌红蛋白溶液，保持搅拌。控制染料与蛋白的摩尔比在3–5:1范围，避免过度标记导致蛋白聚集或活性降低。

马来酰亚胺偶联：若选择半胱氨酸为偶联位点，可在弱碱性缓冲液（pH 7.0–7.4）中加入CY7-马来酰亚胺酯，形成稳定的硫醚键。

反应时间与条件

反应通常在室温避光条件下进行2–6小时，必要时可在4℃缓慢进行，以保护蛋白构象。反应pH和温度需严格控制，防止血红素氧化或蛋白聚集。

纯化与表征

反应结束后，通过透析、凝胶过滤或离心柱去除未结合的游离CY7分子。纯化后的CY7-Mb可通过UV-Vis光谱确认标记比例，通过荧光光谱确认荧光活性，并通过圆二色谱或酶活检测评估蛋白结构完整性和氧结合能力。

储存与应用

CY7-Mb通常在低温缓冲液中储存，避免长时间光照。标记蛋白适用于体外蛋白-蛋白相互作用研究、荧光成像、氧结合动力学追踪以及纳米载体递送系统研究。

通过上述步骤获得的CY7-Myoglobin既保留了肌红蛋白功能，又具备稳定的近红外荧光信号，可用于多种实验体系中动态监测和成像研究。

产品名称：CY7-Myoglobin，MYO，Mb，CY7标记肌红蛋白

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

推荐产品：

Cy5.5-bis-NHS花菁染料CY5.5标记双琥珀酰亚胺酯

Cy5.5-bisacid花菁染料CY5.5标记双酸

CY5.5-Avidin花菁染料CY5.5标记亲和素

花菁染料CY5.5标记亲和素CY5.5-Avidin

CY5.5-抗氧化酶CY5.5-Antioxidase

仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09