CY7-Arginine,CY7标记精氨酸的纯化方法
CY7-Arginine是通过将近红外荧光染料Cyanine7与精氨酸(Arginine, Arg)分子偶联形成的标记化合物。精氨酸是一种带正电荷的氨基酸,具有α-氨基和侧链胍基,可通过化学修饰实现共价偶联。CY7标记使其具备近红外荧光特性,为分子追踪、蛋白结合研究及药物载体功能分析提供实验工具。纯化与表征是获得高质量CY7-Arginine的关键环节,保证标记效率、分子稳定性及荧光活性。
纯化方法:
反应终止与前处理
偶联反应完成后,首先通过调节pH或添加羟胺/甘氨酸终止未反应的活性基团。此步骤可避免残余CY7-NHS酯或其他活性染料继续反应,防止生成副产物。
去除游离染料
未偶联的CY7分子需通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱(HPLC)去除。透析通常使用分子量截留约1 kDa的膜,充分洗脱未结合的染料。HPLC纯化则通过反相柱或离子交换柱分离,分辨偶联物和游离染料。
溶剂选择
在纯化过程中,常用水相缓冲液(PBS, pH 7.2–7.4)或适量有机溶剂(如少量乙腈)以提高溶解性,同时避免染料自聚集或沉淀。
表征方法:
光谱分析
紫外-可见光谱(UV-Vis):通过测定CY7标记物在近红外区(约750–780 nm)的吸收峰确认偶联成功,并可计算染料与精氨酸摩尔比。
荧光光谱:测定标记物的激发和发射波长,评估荧光活性和稳定性。
质谱分析
通过质谱(如ESI-MS或MALDI-TOF)检测标记物的分子量,确认CY7与精氨酸共价偶联的分子结构及纯度。
核磁共振(NMR)
^1H-NMR或^13C-NMR可用于验证精氨酸与CY7偶联的化学结构,观察侧链或α-氨基化学位移变化。
薄层色谱(TLC)
可作为快速纯度检测方法,通过溶剂体系分离偶联物和游离染料,荧光成像辅助评估标记效率。
通过上述纯化与表征步骤,获得的CY7-Arginine具备高纯度、稳定荧光信号和良好溶解性,可用于细胞摄取研究、蛋白结合动力学分析及荧光追踪实验。
产品名称:CY7-Arginine,CY7标记精氨酸
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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