常用名 5-氯甲基荧光素二乙酸酯
英文名 Cellhunt Green CMFDA [5-Chloromethylfluorescein Diacetate]
CAS号 136832-63-8
分子量 464.85100
密度 1.49 g/cm3
沸点 657.5ºC at 760 mmHg
分子式 C25H17ClO7
闪点 238.3ºC
化学性质:
CMFDA是一种细胞渗透性荧光前体分子。其分子结构中含有两个乙酸酯基团,使其能够轻松穿过细胞膜。在进入活细胞后,胞内酯酶会水解这些乙酸酯基,生成高度活性的荧光产物——带有巯基的氯化荧光素(chloromethylfluorescein)。生成的荧光分子会与细胞内的巯基蛋白发生共价结合,从而实现长时间的细胞标记。由于其化学性质稳定,不易随时间和细胞分裂丢失,因此适合用于长时间追踪细胞动态变化。
应用领域:
活细胞示踪:可用于跟踪单个细胞或细胞群在培养环境中的迁移、分裂与增殖。
流式细胞分析:在荧光通道中可检测到标记细胞,用于分析细胞群体动态变化。
共培养或迁移实验:适合与其他荧光探针组合使用,实现多色细胞追踪。
荧光成像实验:适用于荧光显微镜或共聚焦显微镜观察,具有高灵敏度和低背景信号特点。
使用注意事项:
CMFDA应储存在-20°C避光保存,避免长期暴露于光照下导致荧光衰减。
使用前应溶解于干燥的DMSO中,避免水分导致水解失活。
在细胞染色时,需要根据细胞类型和实验目的优化染料浓度和孵育时间,防止过量染料对细胞产生应激。
标记后的细胞应尽量避免反复冻融,以免荧光信号丢失。
关于我们:
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