产品名称:Phalloidin-AF594,AF594鬼笔环肽
Phalloidin-AF594(AF594 鬼笔环肽)是鬼笔环肽(Phalloidin)与 AF594 荧光染料通过化学偶联形成的特异性荧光探针,其设计巧妙地结合了鬼笔环肽对肌动蛋白(Actin)的高度特异性结合能力与 AF594 染料的高效红色荧光发射特性,成为细胞生物学研究中可视化细胞骨架(尤其是微丝骨架)的核心工具,广泛应用于细胞形态观察、细胞运动研究、细胞分裂监测等领域,为科研人员揭示细胞内部结构与功能的关系提供了直观、精准的研究手段。
从分子组成与作用机制来看,Phalloidin-AF594 的两个核心组件各具关键功能,且协同作用实现对微丝骨架的特异性标记。鬼笔环肽是从剧毒蘑菇(如鬼笔鹅膏 Amanita phalloides)中提取的一种环状七肽化合物,其分子结构具有高度的刚性与特异性,能够以 1:1 的比例与细胞内的肌动蛋白单体(G-actin)及由肌动蛋白单体聚合形成的微丝(F-actin,即肌动蛋白丝,是细胞骨架的重要组成部分)特异性结合,尤其对 F-actin 的结合亲和力极高(解离常数 Kd 通常在纳摩尔级别,约 10-9 M),且结合后形成的复合物具有极强的稳定性 —— 鬼笔环肽与 F-actin 结合后,可抑制 F-actin 的解聚,使微丝骨架保持稳定状态,这一特性不仅确保了标记过程中微丝结构不被破坏,还能增强荧光信号的持续性,便于长时间观察。同时,鬼笔环肽的环状结构使其能够精准嵌入 F-actin 的螺旋结构中,结合过程不受细胞内其他蛋白质或小分子的干扰,具有极高的特异性,避免了对细胞内其他结构的非特异性标记,保证了成像结果的准确性。
AF594 作为 Alexa Fluor 系列荧光染料中的红色荧光成员,是 Phalloidin-AF594 实现荧光可视化的关键。AF594 的激发波长约为 590-594nm,发射波长约为 617nm,处于可见光的红色波段,该波段具有显著的优势:一方面,生物组织与细胞自身的自发荧光在红色波段较弱,可大幅降低背景荧光干扰,提升成像的信噪比,使微丝骨架的细节(如丝状伪足、片状伪足、应力纤维等)清晰可见;另一方面,红色荧光的穿透能力相较于绿色、蓝色荧光更强,在厚组织切片或活细胞三维成像中,能够更深入地观察细胞内部的微丝分布,减少光散射对成像质量的影响。此外,AF594 具备高荧光量子产率(约 0.6-0.7)与优异的光稳定性,前者确保了荧光信号的高亮度,即使在低浓度探针孵育下也能被灵敏检测,适用于微丝含量较低的细胞或区域标记;后者则可有效抵抗光漂白,在长时间成像(如活细胞微丝动态变化观察)过程中,荧光信号保持稳定,避免因光漂白导致的成像结果失真,为获取连续、可靠的实验数据提供保障。
在化学偶联层面,鬼笔环肽与 AF594 的偶联过程经过精细设计,以确保两者的功能均不受影响。鬼笔环肽分子上的特定氨基或羧基作为反应位点,在温和的化学条件下(如使用 EDC/NHS 作为活化剂),与 AF594 分子上的羧基或氨基发生酰胺化反应,形成稳定的共价键,构建 Phalloidin-AF594 复合物。偶联过程中,通过控制反应条件与反应物比例,可确保每个鬼笔环肽分子仅偶联一个 AF594 分子,避免因多染料偶联导致的荧光猝灭或鬼笔环肽结合活性降低;同时,偶联后的复合物仍保持良好的水溶性 ——AF594 分子上的亲水性基团(如磺酸基)与鬼笔环肽的环状结构协同作用,使 Phalloidin-AF594 在细胞培养液或缓冲液中不易聚集,能均匀分散,顺利进入细胞内部与 F-actin 结合,且对细胞的毒性较低,不会显著影响细胞的正常生理活动(如细胞增殖、迁移、分裂等),适用于活细胞与固定细胞的标记。
在细胞生物学研究的应用场景中,Phalloidin-AF594 的优势得到充分发挥,成为微丝骨架研究的 “金标准” 工具。在固定细胞成像中,Phalloidin-AF594 是观察微丝骨架形态与分布的首选探针。例如,在研究细胞黏附与铺展过程时,通过固定不同时间点的细胞并使用 Phalloidin-AF594 标记,可清晰观察到微丝骨架从初始的弥散分布逐渐组装为应力纤维、片状伪足等结构,直观反映细胞铺展的动态变化;在肿瘤细胞迁移研究中,标记后的微丝骨架可显示肿瘤细胞前端的丝状伪足(负责感知环境信号与细胞前进)与后端的收缩纤维(提供迁移动力),为分析肿瘤细胞迁移机制提供结构依据;在细胞分裂研究中,Phalloidin-AF594 可标记分裂细胞中的收缩环(由微丝与肌球蛋白组成,负责胞质分裂),观察收缩环的形成、收缩过程,揭示胞质分裂的调控机制。
产地:西安
规格:50mg 100mg 500mg
纯度:95%
状态:固体/粉末
储藏条件:冷藏
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!
西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发,生产,销售为一体的高科技企业,可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等,可以满足不同客户的定制需求。
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小编:HLL 2025年9月4日