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AF594 Concanavalin A,Alexa Fluor594 标记刀豆蛋白 A
发布时间:2025-09-03     作者:HLL   分享到:

产品名称:Alexa Fluor594 标记刀豆蛋白 A

英文名称:AF594 Concanavalin A

AF594 Concanavalin A(Alexa Fluor594 标记刀豆蛋白 A,简称 AF594-ConA)是一类将荧光染料 Alexa Fluor594(AF594)与刀豆蛋白 A(Concanavalin A,ConA)通过化学偶联形成的功能性生物探针,其核心功能是利用 ConA 对特定糖类的特异性结合能力与 AF594 的荧光报告特性,实现对生物样本中 α-D - 甘露糖、α-D - 葡萄糖及其衍生物的荧光定位与检测,广泛应用于细胞生物学、微生物学、病理学等领域的糖基化研究、细胞膜结构分析及病原体识别等实验。


首先,刀豆蛋白 A(ConA)作为一种天然植物凝集素,是该探针实现糖类靶向结合的核心组件。ConA 来源于刀豆(Canavalia ensiformis)种子,其分子结构为四聚体(分子量约 102 kDa),每个亚基均含有一个特异性的糖类结合位点,能够与 α-D - 甘露糖、α-D - 葡萄糖及其寡糖衍生物(如甘露聚糖、葡聚糖)发生高度特异性的非共价结合,结合亲和力强(解离常数 Kd 通常在 10⁻⁶-10⁻⁷ mol/L 范围),且不受其他常见糖类(如 β- 半乳糖、蔗糖、果糖)的干扰。这种糖类结合特异性是 ConA 区别于其他凝集素(如麦胚凝集素 WGA,特异性结合 N - 乙酰葡糖胺与唾液酸)的关键,使其成为研究富含 α- 甘露糖 / 葡萄糖糖链的生物分子(如糖蛋白、糖脂)的理想工具。此外,ConA 的结合过程具有可逆性,可通过在体系中加入过量的 α- 甲基甘露糖苷(α-MM)竞争结合位点,实现结合与解离的调控,这一特性在动态研究(如糖链的内化过程观察)中具有重要价值。


其次,Alexa Fluor594(AF594)作为荧光报告基团,为探针提供了优异的光学性能。AF594 属于红光波段荧光染料,其最大激发波长约为 590 nm,最大发射波长约为 617 nm,该波段的荧光在生物成像中具有显著优势:一方面,红光的穿透能力较强,能够有效穿透较厚的生物样本(如组织切片、3D 细胞球),减少样本对光的吸收与散射,适用于深层组织的成像分析;另一方面,生物样本(如细胞、组织)自身的自发荧光在红光波段极弱,能够最大限度降低背景信号干扰,显著提升成像的信噪比,尤其适合对低丰度糖链的检测。此外,AF594 具有极高的荧光量子产率(约 0.6)和出色的光稳定性,相较于传统的红光染料(如 Cy3、罗丹明类),其在长时间激光照射下不易发生光漂白,能够满足活细胞动态成像、长时间追踪糖链分布变化的实验需求,例如在观察细胞表面糖链的内吞过程或细菌表面糖基的动态表达时,可确保数小时内荧光信号的稳定输出。同时,AF594 的荧光光谱与其他常用荧光染料(如绿光 AF488、蓝光 DAPI)的光谱重叠度低,适用于多色荧光成像实验,可同时标记糖类与其他生物分子(如蛋白质、核酸),实现多组分的共定位分析。


从化学偶联工艺来看,AF594 与 ConA 的偶联需兼顾荧光性能与凝集素活性的保留。通常采用 NHS 酯偶联法:AF594 通过化学修饰引入 NHS 酯基团(AF594-NHS),该基团可与 ConA 分子中赖氨酸残基的伯氨基(-NH₂)发生特异性反应,形成稳定的酰胺键(-CONH-),实现荧光染料与凝集素的共价连接。偶联过程中需严格控制反应条件(如 pH 值 7.2-8.0、常温、适宜的染料与 ConA 摩尔比),以确保以下两点:一是避免 ConA 的糖类结合位点因化学修饰而失活,通常通过预实验优化摩尔比(一般为 5:1 至 15:1),减少染料分子对结合位点的空间位阻或电子效应影响;二是避免 ConA 过度标记导致的聚合或溶解性下降,适度的标记密度(通常每个 ConA 四聚体结合 4-8 个 AF594 分子)可在保证荧光强度的同时,维持 ConA 的天然四聚体结构与水溶性。偶联完成后,需通过凝胶过滤层析(如 Sephadex G-25 柱)去除未反应的游离 AF594,确保探针的纯度,避免游离染料的背景荧光干扰实验结果。

产地:西安

规格:50mg 100mg 500mg

纯度:95%

状态:固体/粉末

储藏条件:冷藏

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发,生产,销售为一体的高科技企业,可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等,可以满足不同客户的定制需求。

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小编:HLL 2025年9月4日

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