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AF488-streptavidin conjugate,AF488 标记链霉亲和素偶联物
发布时间:2025-09-03     作者:HLL   分享到:

产品名称:AF488 标记链霉亲和素偶联物

英文名称:AF488-streptavidin conjugate

AF488 标记链霉亲和素偶联物是生物医学研究领域中应用广泛的荧光探针,其核心价值在于将 AF488 荧光染料的光学优势与链霉亲和素的生物结合特性完美融合,为靶向检测、分子示踪及生物分子相互作用研究提供高效工具。从组成结构来看,该偶联物由两部分关键成分构成:一是 AF488 荧光染料,作为常用的绿色荧光探针,它具有出色的光学性能,激发波长约为 495nm,发射波长约为 519nm,荧光量子产率高,光稳定性强,能有效减少光漂白现象,确保长时间实验过程中荧光信号的稳定输出;二是链霉亲和素,一种源自链霉菌的蛋白质,分子质量约为 60kDa,由四个相同的亚基组成,每个亚基都能与生物素(维生素 B7)发生特异性、高亲和力的结合,其解离常数(Kd)低至 10-15mol/L,这种极强的结合能力被誉为 “生物亲和作用的黄金标准”,且不受 pH 值、温度、离子强度等常见实验条件的显著影响,为实验的稳定性和可靠性提供保障。


在制备工艺上,AF488 标记链霉亲和素偶联物的生产需严格控制反应条件以确保偶联效率和产物质量。通常采用活性酯法或马来酰亚胺法进行偶联:活性酯法是利用 AF488 分子上的活性酯基团(如 NHS 酯)与链霉亲和素表面赖氨酸残基的氨基发生酰胺化反应,形成稳定的共价键;马来酰亚胺法则针对链霉亲和素表面半胱氨酸残基的巯基,通过马来酰亚胺基团与之发生硫醚键反应实现偶联。制备过程中,需精准控制染料与蛋白质的摩尔比例(通常为 3-5:1),避免过高的染料修饰导致链霉亲和素的空间结构改变或结合活性下降,同时也要防止修饰不足影响荧光信号强度。偶联完成后,还需通过凝胶过滤层析、透析等纯化手段去除未反应的游离染料和杂质,确保最终产物的纯度,减少非特异性信号干扰。


在应用场景方面,该偶联物凭借其优异的性能,在免疫荧光检测、流式细胞术、荧光原位杂交(FISH)、生物芯片分析等领域发挥着不可替代的作用。在免疫荧光检测中,可与生物素标记的一抗或二抗配合使用,实现对细胞内特定抗原的定位与定量分析,例如在肿瘤细胞标志物检测中,通过 AF488 的绿色荧光信号,能够清晰观察到标志物在细胞内的分布情况,辅助肿瘤的早期诊断与分型研究;在流式细胞术中,它可作为荧光探针标记细胞表面的生物素化分子,实现对特定细胞群体的快速识别、分选与计数,其高荧光强度和特异性结合能力,能有效提高检测的灵敏度和准确性,满足复杂细胞样本分析的需求;在生物芯片分析中,将生物素标记的探针固定于芯片表面,再与 AF488 标记链霉亲和素偶联物结合,通过荧光扫描可实现对靶标分子的高通量检测,广泛应用于基因表达分析、蛋白质相互作用筛选等研究领域。此外,在活细胞成像研究中,由于 AF488 具有良好的细胞膜通透性和低细胞毒性,该偶联物还能用于实时追踪生物素标记的生物分子在活细胞内的动态运输与代谢过程,为揭示细胞生理机制提供直观的影像数据。


在使用过程中,需注意以下关键事项以确保实验效果:一是储存条件,该偶联物通常需在 - 20℃避光保存,避免反复冻融,可加入适量甘油(如 50% 终浓度)提高低温稳定性,防止蛋白质变性或染料降解;二是浓度选择,需根据具体实验需求(如检测方法、样本类型、靶标丰度)优化偶联物的使用浓度,过高浓度可能导致非特异性结合增加,过低浓度则可能使荧光信号微弱难以检测,一般建议通过预实验确定最佳工作浓度;三是背景控制,实验中需设置空白对照(仅加偶联物)和阴性对照(不加靶标分子),排除非特异性结合带来的背景信号干扰,同时可使用封闭剂(如牛血清白蛋白、脱脂奶粉)封闭样本表面的非特异性结合位点,进一步降低背景噪音;四是兼容性,需确认该偶联物与实验体系中的缓冲液、试剂(如固定剂、透化剂)是否兼容,避免因化学相互作用影响偶联物的稳定性或荧光性能,例如某些强氧化剂可能导致荧光染料淬灭,需提前进行兼容性测试。

产地:西安

规格:50mg 100mg 500mg

纯度:95%

状态:固体/粉末

储藏条件:冷藏

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发,生产,销售为一体的高科技企业,可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等,可以满足不同客户的定制需求。

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小编:HLL 2025年9月4日

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