产品名称：AF488 标记小麦胚芽凝集素，AF488 标记小麦胚芽凝集素

AF488 标记小麦胚芽凝集素（AF488-WGA）是生物医学研究中用于细胞表面糖基检测与细胞膜可视化的核心荧光探针，其设计核心在于将 AF488 绿色荧光染料的优异光学特性与小麦胚芽凝集素（WGA）的糖结合特异性深度整合，为细胞生物学、分子生物学及临床前研究提供高灵敏度、高特异性的检测工具。从分子构成来看，该探针由两大功能单元协同作用：其一为 AF488 荧光染料，作为 Alexa Fluor 系列中应用最广泛的绿色荧光分子之一，它具备卓越的光学参数 —— 激发波长约 495nm，发射波长约 519nm，荧光量子产率高达 0.92，光稳定性远超传统荧光素（FITC），能有效抵抗长时间激发光照射导致的光漂白，确保实验过程中荧光信号的持续稳定；同时，其荧光光谱峰形尖锐，与其他颜色荧光染料（如红色 AF594、蓝色 AF350）的光谱重叠度低，可满足多色荧光共定位实验的需求，实现对细胞内多种靶点的同步观测。其二为小麦胚芽凝集素（WGA），一种从小麦胚芽中纯化得到的凝集素蛋白，分子质量约 36kDa，呈同源二聚体结构，每个亚基均含有两个独立的糖结合位点，对细胞表面广泛存在的 N - 乙酰葡糖胺（GlcNAc）和唾液酸（Sia）具有高度特异性亲和力 —— 这两种糖基是哺乳动物细胞膜糖蛋白、糖脂的关键组成部分，在上皮细胞、免疫细胞、神经细胞等各类细胞表面均有丰富表达，这种广谱且精准的结合特性，使 WGA 成为细胞膜标记与糖基化分析的理想分子载体。

在制备工艺层面，AF488-WGA 的偶联生产需兼顾染料的光学活性与凝集素的生物结合活性，整个过程需严格控制反应参数以确保产物性能稳定。目前主流的偶联方法为活性酯介导的共价偶联：首先对 AF488 进行化学修饰，引入 N - 羟基琥珀酰亚胺酯（NHS 酯）活性基团，该基团可与 WGA 分子表面赖氨酸残基的 ε- 氨基发生特异性酰胺化反应，形成不可逆的共价键，从而实现染料与蛋白质的稳定连接。偶联反应通常在温和的缓冲体系中进行，优选 pH 7.2-7.4 的磷酸盐缓冲液（PBS），此 pH 范围既能保证 NHS 酯的反应活性，又可避免 WGA 因 pH 过高或过低发生变性；反应温度控制在室温（20-25℃），反应时间设定为 1-2 小时，期间需持续温和搅拌，确保反应体系均匀，减少局部浓度过高导致的聚合反应。制备过程中的核心控制点是染料与 WGA 的摩尔比例（D/P 比），通常优化为 3-5:1—— 若 D/P 比过高，过多的 AF488 分子修饰会占据 WGA 的糖结合位点或改变其空间构象，导致 WGA 对 GlcNAc 和唾液酸的结合能力显著下降；若 D/P 比过低，则探针的荧光信号强度不足，难以满足低丰度糖基检测的需求。因此，需通过紫外 - 可见分光光度法精准测定 D/P 比：利用 AF488 在 495nm 的特征吸光度和 WGA 在 280nm 的蛋白质吸光度，结合朗伯 - 比尔定律计算两者的摩尔比例，确保最终产物的 D/P 比稳定在 3.5-4.5 的最佳区间，兼顾荧光强度与生物活性。偶联反应完成后，需通过凝胶过滤层析（如 Sephadex G-25 凝胶柱）进行纯化，利用分子质量差异（AF488-WGA 约 40kDa，游离 AF488 约 1kDa）分离偶联物与未反应的游离染料；同时，通过透析去除反应体系中的小分子杂质（如 NHS、缓冲盐），最终获得纯度大于 95% 的 AF488-WGA 探针，显著降低非特异性结合带来的背景信号干扰。

在应用领域方面，AF488-WGA 凭借其绿色荧光的高辨识度和对细胞膜糖基的特异性结合，在细胞成像、糖基化研究、病原体入侵机制分析及药物筛选等领域展现出广泛的应用价值。在细胞成像研究中，它是细胞膜标记的 “金标准” 工具之一：由于 WGA 能快速（5-10 分钟）、特异性结合细胞表面糖基，AF488-WGA 可在活细胞或固定细胞中清晰勾勒出细胞膜的完整形态，通过共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）或宽场荧光显微镜，可实时观察细胞的动态行为，如细胞迁移过程中的伪足延伸、细胞凋亡时的细胞膜皱缩与起泡、细胞融合时的膜结构重组等；同时，其绿色荧光信号可与红色荧光标记的细胞器探针（如 AF594 标记的线粒体探针、溶酶体探针）或蓝色荧光标记的细胞核探针（如 DAPI）进行多色共定位，深入分析细胞膜与细胞内结构的相互作用，例如研究细胞内囊泡与细胞膜的融合机制、细胞膜受体的内吞过程等。在糖基化研究中，AF488-WGA 可用于分析细胞表面糖基化模式的变化：正常细胞与病变细胞（如肿瘤细胞、病毒感染细胞）的表面糖基化常存在显著差异，例如肿瘤细胞表面的唾液酸表达水平通常升高，AF488-WGA 与细胞的结合荧光强度会随之增强，通过荧光强度定量分析，可快速评估细胞糖基化的异常程度，为肿瘤早期诊断、病理分型及预后评估提供分子依据；此外，在干细胞分化研究中，AF488-WGA 可作为糖基化标志物，追踪干细胞分化过程中细胞膜糖基的动态变化，揭示分化调控的分子机制。在病原体入侵机制研究中，许多病毒（如流感病毒、轮状病毒）和细菌（如大肠杆菌、链球菌）通过识别宿主细胞表面的 GlcNAc 或唾液酸作为入侵受体，AF488-WGA 可与病原体竞争结合这些糖基受体，通过检测荧光信号的变化，定量分析病原体与宿主细胞的结合效率，明确病原体入侵的关键受体；同时，利用 AF488-WGA 标记的细胞膜，可实时追踪病原体进入细胞后的运输路径，为抗病毒、抗菌药物的作用靶点筛选提供直观证据。在药物筛选领域，AF488-WGA 可用于评估药物对细胞糖基化的调控作用：某些药物（如抗肿 药物、抗炎药物）通过抑制或激活糖基转移酶、糖苷酶的活性，改变细胞表面糖基的表达水平，通过检测 AF488-WGA 与细胞的结合荧光强度，可快速筛选出能调控细胞糖基化的候选药物；此外，在药物毒性评估中，AF488-WGA 可通过观察细胞膜形态的变化（如完整性破坏、通透性增加），早期判断药物对细胞的毒性作用，加速药物研发进程。

产地：西安

规格：50mg 100mg 500mg

纯度：95%

状态：固体/粉末

储藏条件：冷藏

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发，生产，销售为一体的高科技企业，可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等，可以满足不同客户的定制需求。

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小编：HLL 2025年9月4日