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CY7-ConA,CY7刀豆球蛋白A的化学结合特征
发布时间:2025-09-05     作者:axc   分享到:

CY7-ConA,CY7刀豆球蛋白A的化学结合特征

CY7-刀豆球蛋白A(CY7-Con A)是一类通过将近红外花菁染料Cyanine7(CY7)与刀豆球蛋白A(Concanavalin A, Con A)偶联而形成的糖结合荧光探针。其设计核心在于结合Con A对特定糖类分子的高亲和力识别能力,以及CY7在近红外窗口的优异光学特性,从而实现对糖分子或糖蛋白分布的定量、定位与成像研究。

1. Con A的结构与化学结合特征

刀豆球蛋白A是来源于刀豆(Canavalia ensiformis)种子的植物源凝集素,状态下以四聚体存在,总分子量约104 kDa。其单体为约26 kDa的糖结合蛋白,具有典型的β-折叠为主的结构框架。在每个亚基上存在结合Ca²⁺和Mn²⁺的金属离子结合位点,这些离子维持糖识别位点的空间构象,使其能够选择性结合α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖。Con A表面分布着多个赖氨酸残基和少量半胱氨酸残基,提供了反应性化学基团(-NH₂、-SH),便于与荧光染料的活性基团发生共价偶联。

2. CY7染料的化学结构特点

Cyanine7(CY7)是典型的近红外荧光花菁染料,其骨架由两端带有季铵基的吲哚类芳香环通过七个亚甲基链相连,形成高度共轭的结构。此类长共轭体系赋予其在750–770 nm区域的吸收和约780–800 nm的发射波长。其分子中常带有正电荷,并可通过引入磺酸基、PEG链等增强水溶性。CY7的衍生物形式多样,其中NHS酯、马来酰亚胺、叠氮和炔基等为常见活性基团,能够与蛋白质上的赖氨酸ε-氨基或半胱氨酸巯基形成稳定的酰胺键或硫醚键。

3. CY7-Con A的偶联化学特性

CY7-Con A的制备通常采用CY7-NHS酯与Con A赖氨酸残基的氨基进行反应,生成稳定的酰胺键;或采用CY7-马来酰亚胺与Con A预修饰半胱氨酸的巯基反应。通过调整CY7与蛋白摩尔比,可以获得不同修饰度的标记物。常见修饰度为每个Con A亚基1–3个染料分子,以平衡荧光信号强度与蛋白活性保持。若染料过度修饰,可能引起蛋白构象扰动或活性下降。

4. 化学稳定性与环境敏感性

CY7-Con A在中性缓冲液(pH 6.5–8.0)中具有较好的化学稳定性,荧光性质和糖结合能力均能维持。Con A对金属离子依赖性较强,缺乏Ca²⁺和Mn²⁺时糖结合位点会失活,因此其化学特性与金属离子环境密切相关。CY7染料在蛋白环境中受微环境性与构象影响,荧光量子产率可能较游离态略有降低,但其近红外发射特性仍然保持稳定。

5. 荧光特性与化学相容性

CY7-Con A的吸收峰位于750–770 nm,发射峰在780–800 nm,荧光斯托克斯位移小,适合在低背景的近红外区成像。染料的光敏性使其在强光照射下可能发生光漂白,但结合在蛋白表面后可部分缓解猝灭效应。化学上,CY7-Con A可兼容多种生物体系,不易与常见缓冲液成分(PBS、Tris、HEPES等)发生非特异性化学反应,但在强还原或强氧化条件下,蛋白与染料均可能降解。

6. 表面化学与功能化潜力

由于Con A分子表面含有多个活性基团,CY7的标记位点分布相对随机,形成的杂合物在化学上表现为多点修饰的复合物。这类修饰并不影响其四聚体的形成及糖结合活性。进一步,CY7-Con A还可以与其他功能化表面或纳米载体结合,例如通过剩余的氨基或羧基与固相材料连接,实现表面糖识别芯片或纳米探针的构建。

7. 综合化学特性

总体而言,CY7-Con A兼具以下化学特性:

共价稳定性:染料与蛋白通过稳定的酰胺键或硫醚键结合,避免了游离染料的流失。

功能保持性:在合理修饰度下,Con A的糖识别活性不受影响。

金属依赖性:其结合功能依赖Ca²⁺与Mn²⁺,缺乏离子时化学功能会下降。

环境相容性:适合在中性缓冲条件下应用,兼容常见生物体系。

荧光稳定性:保持CY7的近红外荧光特性,可用于实时成像与定量检测。

产品名称:CY7-ConA,CY7刀豆球蛋白A

纯度:95%+

性状:固体或液体

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家:齐岳生物

CY7-ConA

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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