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Cyanine7-PEG-Protein A,CY7-聚乙二醇-蛋白A的纯化与表征
发布时间:2025-09-05     作者:axc   分享到:

Cyanine7-PEG-Protein A,CY7-聚乙二醇-蛋白A的纯化与表征

CY7-聚乙二醇-蛋白A(Cyanine7-PEG-Protein A,简称CY7-PEG-Protein A)是一种将近红外荧光染料Cyanine7(CY7)与蛋白质A(Protein A)通过聚乙二醇(PEG)链连接而形成的功能性复合物。该复合物融合了荧光标记、PEG化改性和蛋白质特异性结合能力,具有生物成像、免疫分析及靶向分子捕获等多重功能。Protein A是一种来源于金黄色葡萄球菌的表面蛋白,可特异性结合IgG的Fc段,从而在免疫学实验中作为抗体捕获或检测工具。CY7染料赋予复合物近红外荧光特性,可实现低背景、高穿透的标记与追踪;PEG链提供水溶性、柔性缓冲和生物相容性,同时降低非特异性吸附,提高复合物在体内外实验中的稳定性。

CY7-PEG-Protein A的制备方法一般包括三步:

1. CY7染料活化与偶联:

选用末端含活性官能团的CY7染料(如NHS酯或马来酰亚胺衍生物),通过酰胺化或硫醚化反应将染料共价偶联至PEG链的末端。PEG链可选线性或支化结构,其长度一般为2–20 kDa,可调节水溶性、空间位阻及复合物稳定性。此步骤确保染料的近红外荧光特性被保留,同时PEG链提供柔性缓冲,降低染料自聚集和荧光猝灭。

2. PEG链与Protein A偶联:

将CY7-PEG末端活性基团(如NHS酯或Maleimide)与Protein A的赖氨酸氨基或半胱氨酸巯基反应,形成稳定的共价键(酰胺键或硫醚键)。反应条件通常选择温和的缓冲体系(如pH 7.2–7.5的磷酸盐缓冲液),控制温度在4–25°C,避免蛋白质变性。偶联比可通过调整活性基团与蛋白浓度来优化,以保证Protein A的Fc段结合能力和荧光信号同时保持。

3. 纯化与表征:

偶联反应完成后,使用透析、凝胶过滤色谱或离心超滤等方法去除未反应的CY7-PEG和低分子杂质。纯化后的CY7-PEG-Protein A通过紫外-可见光谱或荧光光谱确认CY7的吸收与发射特性,并通过SDS-PAGE或动态光散射(DLS)评估蛋白质大小和聚集状态。此外,可使用酶联免疫吸附实验(ELISA)验证Protein A的Fc结合功能是否保留。

CY7-PEG-Protein A的制备特点在于:结合了荧光标记、PEG化修饰和Protein A特异性功能;采用温和条件确保蛋白质结构和功能不受损;通过PEG链调节水溶性和生物相容性,使复合物适合在体内外免疫分析、抗体捕获及近红外成像应用。该复合物既可以直接用于体外荧光免疫检测,也可作为荧光追踪工具,用于研究抗体分布、抗原-抗体相互作用及相关生物过程。

产品名称:Cyanine7-PEG-Protein A,CY7-聚乙二醇-蛋白A

纯度:95%+

性状:固体或液体

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家:齐岳生物

Cyanine7-PEG-Protein A

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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