DMPE-CY7.5，CY7.5标记二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱的表征方法

DMPE–Cy7.5 是一种将二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺（DMPE, 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine）与近红外荧光染料 Cy7.5 通过共价键结合得到的两亲性荧光探针。其分子具有典型的三部分结构：① 双 C14 饱和脂肪链，赋予其稳定的膜锚定能力；② 磷脂酰乙醇胺头基，提供伯胺官能团作为反应位点；③ 近红外荧光染料 Cy7.5，吸收峰约 780–790 nm，发射峰在 800–820 nm，光稳定性与组织穿透性更优于 Cy7，因此非常适合用于深部活体成像。由于脂质骨架与荧光团之间为共价酰胺键连接，产物具有的结构稳定性与抗淋洗特性，能够在复杂生物环境中保持持久荧光信号。

合成路线主要依赖于 DMPE 氨基与 Cy7.5 活性酯（通常为 Cy7.5–NHS ester）之间的酰胺化反应。反应原理为伯胺作为亲核试剂进攻 NHS 酯中的羰基碳，生成酰胺键并释放 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）副产物。该反应具有高选择性和高效率，避免了染料非特异性修饰。反应需在无水、弱碱性条件下进行，以保持 NHS 酯的稳定性和促进酰胺键形成。

合成步骤可概括为以下几部分：

原料准备：将 DMPE 脱水干燥后溶解在无水氯仿/甲醇或 DMF/氯仿的混合溶剂中。Cy7.5–NHS ester 则溶解在少量无水 DMSO 或 DMF 中，需现配现用以避免水解。

反应进行：在惰性氮气或氩气保护下，按摩尔比 DMPE:Cy7.5–NHS = 1:1.2–1.5 混合，加入少量有机碱（如 DIPEA 或 TEA），避光条件下室温搅拌 8–16 小时。反应过程中，Cy7.5 的长共轭链不会影响伯胺与活性酯的缩合效率。

反应完成：通过薄层色谱（TLC）或质谱监测反应进程。当游离的 Cy7.5–NHS 消耗完全，且体系内主要为目标产物时，反应即可终止。

纯化过程通常采用制备型 HPLC 或硅胶柱层析：

对于大规模合成，常选择反相制备型 HPLC，以水/乙腈或水/甲醇为流动相，并含 0.05–0.1% TFA 或甲酸以改善峰形。由于 DMPE–Cy7.5 较为疏水，其洗脱时间通常晚于游离 DMPE 和染料。

对于实验室小规模制备，也可采用硅胶柱层析，流动相为氯仿/甲醇/水的混合体系，调节比例以实现 DMPE–Cy7.5 与副产物的有效分离。

表征方法包括：

UV–Vis 吸收光谱：在 780–790 nm 观察到 Cy7.5 的特征吸收峰，确认染料结合。

荧光光谱：在 800–820 nm 范围内检测到发射峰，验证其近红外发光性能。

质谱（ESI-MS 或 MALDI-TOF）：确认分子量符合 DMPE 与 Cy7.5 耦合产物的理论值。

¹H NMR 和 ³¹P NMR：用于检测磷脂骨架的完整性以及氨基成功转化为酰胺的结构特征。

HPLC 纯度分析：产物纯度需大于 95%，确保其在后续成像或膜嵌入实验中的可靠性。

DMPE–Cy7.5 的设计使其既具有脂质分子的膜锚定特性，又具备近红外窗口下的高效荧光信号。在应用中，它常用于脂质体或纳米载体的标记，便于追踪脂质体在体内的分布与代谢过程；同时也可作为膜探针用于细胞膜标记和膜蛋白的定位研究。与 Cy7 或 Cy5 等短波长染料相比，DMPE–Cy7.5 在体内成像中背景信号更低、穿透深度更大，能够实现更灵敏和高分辨率的追踪。

产品名称：DMPE-CY7.5，CY7.5标记二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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