ATTO 425 Tyramide 是一种高度敏感的荧光标记底物,广泛应用于分子生物学和生化分析领域,特别适用于信号增强技术如免疫组织化学 (IHC)、免疫印迹 (Western blot) 和原位杂交 (ISH) 等实验中。
ATTO 425 是 ATTO 系列荧光染料之一,其吸收波长为 436 nm,发射波长约为 484 nm,呈现蓝色荧光。这种染料具有出色的光稳定性和高量子产率,使其在长时间观察和定量分析中仍能保持较高的信号强度和稳定性。
化学结构与性质
ATTO 425 Tyramide 是通过酪胺(tyramide)与 ATTO 425 荧光染料共价结合形成的化合物。酪胺是一种含有酚羟基的芳香胺,它在过氧化物酶(如辣根过氧化物酶 HRP)的催化下能够生成自由基,并在邻近的酪氨酸残基上形成共价结合。这一特性使 ATTO 425 Tyramide 成为放大信号的理想工具,可以将微量目标分子的存在通过荧光信号清晰显现出来。其化学稳定性良好,可在常温下长期储存,溶解性良好,可溶于水、DMSO 和部分缓冲液中,方便在多种实验体系中使用。
应用原理
ATTO 425 Tyramide 的核心应用是酶介导的信号放大(TSA, Tyramide Signal Amplification)。在实验中,将目标分子先通过特异性抗体或配体与 HRP 连接。加入 ATTO 425 Tyramide 后,HRP 催化酪胺产生活性自由基,这些自由基会迅速与附近的蛋白质或多糖基团共价结合,从而在目标位置形成高密度荧光标记。相比直接标记荧光染料的传统方法,TSA 技术显著提高了信号强度,使得低丰度分子也能够被检测。ATTO 425 的蓝色荧光特点,使其在多重标记实验中能够与绿色、红色或远红色荧光形成清晰的光谱分离,实现多目标共定位分析。
优势与特点
高灵敏度:通过 HRP 介导的酪胺信号放大,能够检测到极低丰度的目标分子。
优异的光稳定性:在长时间荧光成像或显微观察过程中,信号衰减较慢,保证实验重复性和定量分析的可靠性。
光谱适用性广:蓝色荧光发射与其他常用荧光染料(如 Alexa Fluor 488、Cy3、Cy5 等)兼容,可在多重标记实验中使用。
化学稳定性:在适当条件下可长期储存,且在各种缓冲体系中均表现良好溶解性。
名称:ATTO 425 Tyramide
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
供应:西安齐岳生物科技有限公司
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