英文名称: 6-羧基-H2DCFDA
MF: C25H16Cl2O9
MW: 531.3
CAS: 247044-02-6
6-羧基-H₂DCFDA 是一种广泛使用的 细胞内氧化还原荧光探针,属于荧光二氢荧光素衍生物。
生物学特性与应用
6-羧基-H₂DCFDA 是细胞内 总活性氧(ROS)检测的经典荧光探针,适用于多种细胞类型和实验体系。其主要生物学特点与应用包括:
细胞内 ROS 检测
H₂DCFDA 可穿透细胞膜,进入细胞内被非特异性酯酶去除乙酸酯基,形成非荧光的 H₂DCF。
在存在 ROS(如过氧化氢、超氧阴离子、羟基自由基)时,H₂DCF 被氧化成荧光活性 DCF。
荧光强度与细胞内 ROS 水平呈正相关,可用于氧化应激的定量检测。
细胞信号与氧化应激研究
常用于研究药物处理、化学刺激、病理状态下的细胞氧化应激变化。
可结合共聚焦显微镜、荧光显微镜或流式细胞仪,实现单细胞水平或群体水平的 ROS 检测。
羧基修饰优势
6-羧基修饰增强分子在细胞内的滞留时间,避免快速排出或扩散。
提高染色均匀性和检测灵敏度,尤其适用于定量分析。
实验操作注意事项
使用前尽量在暗处操作,防止荧光素提前光漂白。
溶液制备应在 DMSO 中配制储备液,避光低温保存;工作溶液应尽快使用。
染色时间、浓度和温度需根据细胞类型优化,以获得最佳信噪比。
荧光信号仅反映 氧化活性,不特异于某一种 ROS 类型,因此在解释结果时需结合其他实验方法。
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