产品名称：5-氯甲基荧光素二醋酸酯，5-氯甲基荧光素二醋酸酯

CAS：136832-63-8

5 - 氯甲基荧光素二醋酸酯（CAS 号 136832-63-8，简称 CMFDA）是荧光素衍生物，核心功能是作为细胞通透性荧光探针，用于活细胞标记、细胞活性检测及细胞追踪研究。分子特性方面，CMFDA 本身无荧光，因其结构中的二醋酸酯基团（-OAc）可掩盖荧光团活性，且氯甲基（-CH₂Cl）赋予其细胞通透性 —— 能通过细胞膜进入细胞内；进入细胞后，细胞内的酯酶会水解二醋酸酯基团，释放出具有荧光活性的 5 - 氯甲基荧光素（CMF），同时氯甲基可与细胞内蛋白质的巯基（-SH）形成稳定的硫醚键，实现对细胞的共价标记，标记后的荧光信号可维持数天（取决于细胞增殖速率）。

制备过程需注重酯基稳定性与纯度：首先以荧光素为原料，通过乙酰化反应在羟基位点引入二醋酸酯基团，再通过氯甲基化反应在 5 位引入氯甲基，形成 CMFDA。反应中需控制乙酰化试剂（如乙酸酐）的用量（避免过度乙酰化），氯甲基化反应需在低温（0-5℃）下进行（防止副反应），全程避光操作（避免荧光素光解）。反应后采用柱层析（硅胶柱，洗脱剂为乙酸乙酯 / 石油醚）纯化，去除未反应原料与单乙酰化副产物，并用质谱（MS）和红外光谱（IR）验证分子结构 ——IR 中需出现酯基特征吸收峰（1735 cm⁻¹ 左右）和 C-Cl 键特征峰（750 cm⁻¹ 左右）。

应用场景聚焦活细胞研究：在细胞追踪中，可将 CMFDA 与细胞孵育（37℃，15-30 分钟），标记后的细胞可通过荧光显微镜或流式细胞仪识别，用于研究细胞迁移（如肿瘤细胞侵袭实验）或细胞融合过程；在细胞活性检测中，只有活细胞内的酯酶能水解二醋酸酯基团释放荧光，死细胞无此能力，因此可通过荧光信号强度判断细胞活性 —— 例如评估药物对细胞的毒性（药物处理后荧光细胞比例下降，提示细胞毒性增强）；在细胞共培养实验中，可分别用 CMFDA（绿色荧光）和其他荧光探针（如红色荧光的 CMTPX）标记两种细胞，观察共培养体系中细胞间的相互作用（如免疫细胞与肿瘤细胞的接触过程）；此外，还可用于干细胞研究，标记干细胞后追踪其在体内的分化与定植情况。

产地：西安

规格：50mg 100mg 500mg

纯度：95%

状态：固体/粉末

储藏条件：冷藏

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发，生产，销售为一体的高科技企业，可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等，可以满足不同客户的定制需求。

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小编：HLL 2025年9月9日