产品名称：5-二乙酸酯羧基荧光素琥珀酰亚胺酯

英文名称：5-diacetate FAM NHS

CAS：150206-05-6

5-diacetate FAM NHS（CAS 号 150206-05-6）是 5 - 羧基荧光素的二乙酸酯与 NHS 活性酯双修饰衍生物，核心功能是通过活性酯与氨基反应标记生物分子，同时二乙酸酯基团实现 “荧光沉默 - 激活” 调控，适用于生物分子的体外标记与活细胞内荧光激活成像，尤其适合降低背景荧光干扰的实验。分子特性上，二乙酸酯基团掩盖 5-FAM 的荧光团，未水解时探针荧光强度极低（量子产率＜0.01），标记生物分子后，在活细胞内被酯酶水解去除乙酸酯基团，释放出强荧光（494nm 激发、518nm 发射，量子产率约 0.77）；NHS 活性酯可高效与氨基反应（pH7.0-8.0 条件下反应速率约 10⁴ L/(mol・s)），标记效率高且产物稳定；探针脂溶性略高于 5-FAM NHS Ester，更易穿透细胞膜，适合活细胞内标记。

制备过程需协调双修饰基团的稳定性：以 5-FAM 为原料，先通过乙酰化反应（乙酸酐 / 三乙胺体系）在羟基引入二乙酸酯基团，再与 NHS 在 DCC 催化下生成活性酯。乙酰化反应需在低温（0℃）进行，反应时间 2 小时，避免影响后续活性酯合成；活性酯反应需在无水二氯甲烷中进行，全程避光（防止 5-FAM 光解）；纯化采用反相 HPLC（流动相为乙腈 / 水，含 0.1% 三氟乙酸），确保产物纯度≥98%；通过 ¹H NMR 验证二乙酸酯（δ 2.3-2.5 ppm，-CH₃）与 NHS（δ 2.8-3.0 ppm，琥珀酰亚胺环质子）特征峰，并通过体外水解实验验证荧光激活效率（水解后荧光强度提升≥40 倍）。

应用场景集中在低背景活细胞标记：在活细胞内抗体标记中，可标记含氨基的细胞穿透肽（如 TAT 肽），探针进入细胞后水解激活荧光，追踪肽介导的抗体内化过程，背景荧光降低 50% 以上，清晰观察抗体在细胞内的转运路径；在病毒追踪研究中，可标记病毒表面的含氨基蛋白（如新冠病毒刺突蛋白），通过荧光激活信号观察病毒进入宿主细胞的过程，减少游离探针对观察的干扰；在细胞器靶向标记中，可标记含氨基的细胞器靶向肽（如线粒体靶向肽），仅在线粒体部位激活荧光，实现线粒体的高特异性成像，避免其他细胞器的荧光干扰；此外，还可用于高通量药物筛选，标记含氨基的药物靶点蛋白，通过荧光激活信号监测药物与靶点的结合情况，提高筛选的准确性与效率，为药物研发提供可靠检测手段。

产地：西安

规格：50mg 100mg 500mg

纯度：95%

状态：固体/粉末

储藏条件：冷藏

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发，生产，销售为一体的高科技企业，可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等，可以满足不同客户的定制需求。

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小编：HLL 2025年9月9日