FITC-HSA，FITC-人血清白蛋白的合成过程

FITC-人血清白蛋白（FITC-HSA）是一类经典的荧光标记蛋白衍生物，由荧光素异硫氰酸酯（FITC）与人血清白蛋白（HSA）通过共价键结合形成。HSA 是血浆中含量高的蛋白质，具有较强的稳定性、良好的溶解性和多配体结合能力，是生物医学研究和药物递送体系中常用的载体。而 FITC 是一种带有异硫氰酸活性基团的荧光探针，可以与蛋白质分子上的赖氨酸残基或其他伯胺基团发生反应，实现共价标记。FITC-HSA 的合成过程研究主要涉及反应条件的优化、产物的分离纯化以及标记度的控制和表征。

在合成过程中，通常采用碱性条件促进异硫氰酸酯基团与氨基的亲核加成反应。一般实验方案为：将 HSA 溶解于碳酸氢钠缓冲液（pH 8.3–9.0），以确保赖氨酸 ε-氨基去质子化，从而增强亲核性；随后向溶液中缓慢加入溶解于 DMSO 或 DMF 的 FITC 溶液，使异硫氰酸基团与 HSA 的氨基发生共价偶联，生成硫脲键。反应通常在避光条件下进行，以防止 FITC 荧光团降解。为了获得较好的标记效果，需要严格控制 FITC 与 HSA 的摩尔比。过量的 FITC 可能导致荧光淬灭或蛋白质构象改变，影响其生物学功能；而标记不足又可能导致荧光信号不够敏感。因此，合成研究中会通过不同摩尔比梯度反应实验来确定佳条件。

反应完成后，需要通过一系列纯化步骤去除未反应的游离 FITC。常见的方法包括透析、超滤和凝胶过滤层析（如 Sephadex G-25），这些方法能够有效分离小分子 FITC 与大分子 FITC-HSA，从而获得高纯度产物。纯化后的 FITC-HSA 通常需要进行标记度测定，可通过紫外-可见分光光度法进行计算，依据 FITC 的吸收峰（495 nm）和 HSA 的特征吸收（280 nm），结合摩尔消光系数来确定荧光素标记数量。

在合成过程研究中，还需评估标记反应对 HSA 构象和稳定性的影响。圆二色谱（CD）、荧光光谱和动态光散射（DLS）等表征可用于分析蛋白质的二级结构变化和粒径分布情况。研究发现，适度标记的 FITC-HSA 可以保持 HSA 的原有稳定性和溶解性，而过度标记则可能破坏蛋白质的构象。此外，SDS-PAGE 和质谱分析常被用于验证产物的分子量变化与标记位置分布，从而更深入理解合成机制。

总体而言，FITC-HSA 的合成过程不仅是一个简单的偶联反应，还涉及反应条件的系统优化与产物性质的全面表征。通过对不同反应参数的研究，如 pH、温度、FITC 用量和反应时间等，可以提升标记效率和荧光性能。FITC-HSA 的合成过程研究对于建立稳定可靠的荧光标记蛋白制备方法、推动其在细胞成像、分子示踪、药物递送及生物分析中的应用具有重要意义。

产品名称：FITC-HSA，FITC-人血清白蛋白

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09