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Alexa Fluor 647 N3,AF 647-叠氮,Alexa Fluor 647 叠氮化物
发布时间:2025-09-12     作者:HLL   分享到:

产品名称:Alexa Fluor 647 N3,AF 647-叠氮,Alexa Fluor 647 叠氮化物

Alexa Fluor 647 N3(AF 647 - 叠氮,Alexa Fluor 647 叠氮化物)是 Alexa Fluor 647 荧光染料与叠氮基团(-N₃)通过稳定碳 - 氮键偶联形成的功能性探针,其核心技术价值在于将叠氮基团的 “点击化学活性” 与 Alexa Fluor 647 的 “近红外荧光优势” 结合,实现对生物分子、细胞及活体样本的高特异性、低毒性荧光标记,是当前生物医学研究中 “无铜点击化学标记” 的核心工具之一。从化学反应机制来看,叠氮基团(-N₃)是典型的 “点击化学受体”,可参与两类关键的特异性反应:其一,与环辛炔类化合物(如 DBCO、BCN)发生应变促进叠氮 - 炔环加成反应(SPAAC)—— 该反应属于无铜点击化学,无需铜离子(Cu (I))催化剂,仅依赖环辛炔的环张力(如 DBCO 的环张力能约 25 kcal/mol)驱动反应,在室温、中性 pH 缓冲液(如 PBS,pH 7.4)中即可快速进行,反应速率常数高达 10³-10⁴ M⁻¹s⁻¹,且产物为稳定的三唑环结构,不与生物分子中的氨基、羧基、巯基等天然官能团发生非特异性反应,彻底避免了铜离子对活细胞的毒性(如诱导活性氧生成、破坏蛋白质结构)与非特异性结合导致的背景干扰;其二,与反式环辛烯(TCO)发生逆电子需求 Diels-Alder(IEDDA)反应 —— 该反应同样无需催化剂,反应速率更快(速率常数可达 10⁴-10⁵ M⁻¹s⁻¹),且具有 “生物正交性”(即不干扰细胞正常生理过程),适合活细胞内快速标记(如几秒至几分钟内完成标记),产物经逆 Diels-Alder 反应后释放的小分子(如氮气)对细胞无毒性,进一步提升了生物相容性。


在荧光性能方面,Alexa Fluor 647 N3 完全继承了 Alexa Fluor 647 染料的 “近红外核心优势” 与 “高稳定性特质”:激发波长精准定位于 650 nm,发射波长为 665 nm,处于近红外光谱区域(650-900 nm),该区域的光在生物组织中具有三大关键特性 —— 穿透深度深,因组织对近红外光的散射与吸收远低于可见光(如 500-600 nm 区域),可穿透数毫米至厘米级的组织样本(如小鼠脑部组织、肿瘤移植瘤块);背景荧光低,生物样本中的内源性荧光物质(如细胞色素、黄素类化合物)在近红外区域的荧光发射极弱,能将背景信号降至最低,实现高信噪比(S/N>60)的检测;光毒性小,近红外光的光子能量低(约 1.5 eV),不会诱导细胞产生活性氧(ROS)或破坏生物分子结构,适合长时间活细胞成像(如 48 小时动态追踪细胞分裂)。此外,其光稳定性表现卓越 —— 在 633 nm 激光持续照射(功率密度 2 mW/cm²)下,荧光强度衰减至初始值 50% 的时间(T₅₀)超过 150 分钟,远优于同类近红外染料(如 Cy5.5 的 T₅₀ 约 60 分钟);荧光量子产率高达 0.6,即使在低浓度(5 nM)标记下,也能通过常规荧光显微镜或流式细胞仪检测到明亮、稳定的荧光信号;水溶性极佳,分子结构中的磺酸基等亲水基团使其在生物兼容缓冲体系(如 PBS、DMEM 培养基)中的溶解度超过 2 mg/mL,且不易发生聚集(聚集系数<0.05),有效避免了 “聚集诱导淬灭”(ACQ)效应,保证了标记反应的均匀性与重复性。


应用场景上,Alexa Fluor 647 N3 凭借 “无铜、高特异性、近红外荧光” 的组合优势,广泛应用于多个研究领域:在细胞生物学研究中,核心用于活细胞内特异性标记 —— 例如,将 DBCO 修饰的小分子探针(如 DBCO - 葡萄糖)导入活细胞,待其参与细胞代谢后,加入 Alexa Fluor 647 N3,通过 SPAAC 反应标记细胞内的糖代谢产物(如糖原、糖蛋白),再通过共聚焦显微镜观察代谢产物在细胞内的定位(如高尔基体、细胞膜);在免疫学研究中,用于免疫细胞的特异性标记与分选 —— 将 DBCO 修饰的抗体(如抗 CD4 抗体)与 T 细胞孵育,再加入 Alexa Fluor 647 N3,通过 SPAAC 反应实现对 CD4⁺ T 细胞的荧光标记,随后通过流式细胞术分选该细胞群体,用于后续的功能研究(如细胞因子分泌检测);在核酸研究中,用于荧光原位杂交(FISH)探针的制备 —— 将 TCO 修饰的 DNA 探针与 Alexa Fluor 647 N3 通过 IEDDA 反应偶联,制备近红外荧光 FISH 探针,用于检测染色体异常(如染色体易位、缺失)或病毒核酸(如 HPV 病毒 DNA)在细胞内的整合情况,因近红外荧光的穿透性强,还可用于厚组织切片(如 10 μm 石蜡切片)的 FISH 成像;在药物研发领域,用于药物分子的体内追踪 —— 将 TCO 修饰的药物载体(如脂质体、聚合物纳米粒)静脉注射到小鼠体内,待载体到达靶部位(如肿瘤)后,通过尾静脉注射 Alexa Fluor 647 N3,利用 IEDDA 反应实现对载体的原位荧光标记,再通过小动物活体成像系统(如 IVIS Lumina)观察载体在肿瘤部位的富集效率与滞留时间,为药物载体的优化提供依据;在分子影像学研究中,用于活体肿瘤的靶向成像 —— 将 DBCO 修饰的肿瘤靶向肽(如 RGD 肽,靶向肿瘤血管整合素 αvβ3)与 Alexa Fluor 647 N3 混合后注射到荷瘤小鼠体内,通过 SPAAC 反应在体内形成荧光标记的靶向探针,实现对肿瘤的无创、实时成像,助力肿瘤的早期诊断与疗效评估;此外,在生物制药领域,还可用于抗体药物偶联物(ADC)的纯度检测 —— 将 DBCO 修饰的检测抗体与 ADC 孵育,再加入 Alexa Fluor 647 N3,通过 SPAAC 反应标记 ADC,随后通过高效液相色谱(HPLC)或毛细管电泳(CE)分析 ADC 的纯度与偶联效率,保证制药过程的质量控制。

产地:西安

规格:50mg 100mg 500mg

纯度:95%

状态:固体/粉末

储藏条件:冷藏

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发,生产,销售为一体的高科技企业,可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等,可以满足不同客户的定制需求。

Alexa Fluor 647 叠氮化物

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小编:HLL 2025年9月12日

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