RhodamineB-PEG-Chitosan,RB-聚乙二醇-壳聚糖的反应机理
RB-聚乙二醇-辣根过氧化物酶(RhodamineB-PEG-HRP)是一种兼具荧光标记与酶学催化功能的复合物,由荧光染料罗丹明B(Rhodamine B)、亲水性聚乙二醇(PEG)以及具有强大催化能力的辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)三部分构成。其设计思路在于利用PEG作为柔性间隔臂,既保证了染料与酶蛋白的共价结合,又避免了染料对酶活性的空间位阻或构象干扰,从而实现荧光成像与酶学信号放大的双重功能。RB部分提供高量子产率的红色荧光发射信号,PEG提供水溶性和稳定性,HRP则可催化多种过氧化物底物的氧化反应,生成可检测信号。
其反应机理主要依赖于HRP的血红素活性中心。在经典的过氧化物酶反应中,首先H₂O₂分子与HRP血红素Fe(III)结合,形成HRP–过氧化氢复合物,并发生电子转移生成中间体I(Fe(IV)=O伴随卟啉阳离子自由基)。随后中间体I与供电子底物(如苯胺、吲哚、对苯二胺或荧光底物Amplex Red等)发生单电子转移,生成中间体II(Fe(IV)=O),同时底物被氧化。后中间体II再与另一分子底物发生单电子转移,恢复为初始的Fe(III)态,完成一个催化循环。在此过程中,HRP能够快速高效地将过氧化氢还原为水,并将底物氧化为有色或荧光增强产物,产生强烈的信号放大效应。
在RB-PEG-HRP中,罗丹明B作为共价修饰标记,与酶催化中心的功能相互独立,主要作用在于提供额外的荧光通道。这种双信号体系在生物检测中具有优势:一方面,HRP催化反应的比色或荧光底物反应实现高灵敏度放大;另一方面,RhodamineB自身的荧光可以作为内部参考或双模态成像信号。PEG链段起到缓冲和稳定作用,使HRP在复杂生理环境中保持较高的溶解度与耐受性,减少非特异吸附与聚集。
该复合物的反应机理应用于多种实验,如免疫印迹、酶联免疫吸附实验(ELISA)、纳米探针构建、活体成像与细胞信号放大检测等。RB-PEG-HRP通过荧光与酶催化反应的结合,拓展了传统HRP偶联物的应用场景,为高灵敏度的多模态分析与平台提供了有力支持。
产品名称:RhodamineB-PEG-Chitosan,RB-聚乙二醇-壳聚糖
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
推荐产品:
CY5-Neurotensin1-6
花菁染料CY5标记神经肽Neurotensin1-6
CY5-Neurotensin9-13
花菁染料CY5标记神经肽Neurotensin9-13
CY5-OVA
花菁染料CY5标记卵清蛋白
CY5-PDDA
仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09