RhodamineB-PEG-Biotin，RB-聚乙二醇-生物素的合成策略

RhodamineB-PEG-Biotin 是一种双功能荧光标记生物素化合物，将高荧光强度的罗丹明B（Rhodamine B）、亲水性的聚乙二醇（PEG）链以及生物素（Biotin）三者有机结合。罗丹明B提供了稳定的红色荧光信号，具有较强的光稳定性和量子产率；PEG链作为柔性亲水间隔臂，有效提高了溶解性，减少了非特异性结合，并增加了生物素基团与受体结合时的可及性；生物素部分则与亲和配体链霉亲和素（Streptavidin, SA）之间形成高亲和性（Kd ≈ 10^-15 M）的结合，是常用的分子识别与标记单元。因此该分子应用于免疫标记、细胞成像、纳米探针修饰以及表面功能化实验。

其合成通常采用逐步偶联策略。首先在RhodamineB与PEG之间通过NHS酯-氨基反应或羧基-氨基缩合反应形成稳定的酰胺键，得到RB-PEG-NH2或RB-PEG-COOH中间体。随后通过生物素的活性衍生物（如Biotin-NHS 或 Biotin-PEG-COOH）与PEG中间体反应，形成RB-PEG-Biotin。PEG作为连接臂的长度可灵活调控，一般在PEG2k–PEG5k范围内，既保持水溶性又确保生物素空间暴露。

在纯化方面，RB-PEG-Biotin 通常采用透析（MWCO依据PEG大小选择，如1–3 kDa）以去除小分子杂质和未反应底物，随后可辅以凝胶过滤层析（如Sephadex G-25）进一步去除自由染料。对于高纯度要求，还可采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）分离，通过紫外-可见光检测器在 555–565 nm 波长下监测RhodamineB的特征吸收峰。

表征手段主要包括：① 紫外-可见光光谱（UV-Vis），显示出RhodamineB的特征吸收峰（约554 nm）；② 荧光光谱，发射峰位于570–590 nm，用以确认染料活性保持；③ 核磁共振氢谱（^1H NMR）和碳谱（^13C NMR），验证PEG与生物素的成功连接；④ 质谱（MALDI-TOF或ESI-MS），用于分子量检测，确认PEG修饰度与完整结构；⑤ SDS-PAGE 与荧光扫描结合，特别适用于蛋白标记场景下确认生物素化荧光探针的结合效果。综上，RB-PEG-Biotin通过光学与结构表征手段可被全面验证，为后续的生物体系实验提供可靠性。

产品名称：RhodamineB-PEG-Biotin，RB-聚乙二醇-生物素

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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