RhodamineB-PEG-RGD,RB-聚乙二醇-线肽的合成过程
RhodamineB-PEG-RGD 是一种荧光标记的肽偶联分子,由罗丹明B(Rhodamine B)、聚乙二醇(PEG)和三肽序列Arg-Gly-Asp(RGD)组成。RGD是存在于纤连蛋白、层粘连蛋白及其他细胞外基质蛋白中的识别序列,可特异性结合整合素受体(如αvβ3、αvβ5),从而实现靶向细胞黏附、迁移及信号调控。通过将RGD与荧光染料及PEG链结合,形成RB-PEG-RGD,可在体外或体内实验中实现对细胞表面整合素的可视化追踪,同时兼具高水溶性和空间柔性。
在合成过程中,首先将罗丹明B通过NHS酯或异硫氰酸酯活化,与末端氨基PEG(NH2-PEG)偶联,生成RB-PEG-NH2中间体。PEG链段通常选择2–5 kDa,以保证溶解性和灵活性,并避免染料直接干扰RGD活性。随后,通过活化RGD肽的羧基(C端)形成NHS-酯,或使用Fmoc固相合成中残留的末端氨基进行保护去保护策略,RB-PEG-NH2与活化的RGD肽在温和缓冲液(pH 7.2–7.4,PBS或HEPES)中发生酰胺化偶联,生成RB-PEG-RGD。
纯化方面,反应结束后需去除游离染料、未反应PEG及多肽副产物。常用方法包括透析(选择分子量截留MWCO 3–5 kDa),结合凝胶过滤层析(如Sephadex G-25)进一步分离。对于高纯度要求,可采用反相高效液相色谱(RP-HPLC),通过荧光检测监控RhodamineB信号,确保目标产物的分离纯度达到90%以上。
表征方法包括:① 紫外-可见光谱检测RhodamineB吸收峰(约554 nm);② 荧光光谱确认发射峰(约580–590 nm);③ MALDI-TOF或ESI-MS质谱确认RB-PEG-RGD的分子量与偶联成功率;④ HPLC分析纯度及反应完成度;⑤ 如果用于细胞实验,可结合荧光显微镜或流式细胞术确认与整合素受体的特异性结合能力。
通过上述策略,RB-PEG-RGD不仅保留了RGD的生物识别功能,同时具有荧光可视化与PEG链的溶解性优势,可应用于细胞成像、靶向药物输送、纳米颗粒表面修饰及生物功能研究。
产品名称:RhodamineB-PEG-RGD,RB-聚乙二醇-线肽
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09