Cy5-Estradiol,花菁染料CY5标记雌二醇的反应步骤概述
CY5-Estradiol 是将花菁染料 Cy5 与雌二醇(Estradiol, E2)共价偶联形成的荧光标记分子,用于体内外示踪、药物递送研究及分子相互作用分析。偶联保留雌二醇的甾体骨架和关键羟基结构,同时引入Cy5荧光信号,实现近红外可视化。
反应步骤概述
雌二醇的活化
选择雌二醇 17β-羟基位点作为偶联位点。
通过碳酸酯化或酯化反应,制备活化中间体,如雌二醇-NHS酯。
该步骤在干燥有机溶剂(如DMF或DMSO)中进行,加入碱性催化剂以促进羟基活化。
Cy5偶联反应
Cy5-NH2 或 Cy5-NHS ester 与活化雌二醇反应生成酰胺或碳酸酯键。
反应在室温下避光条件进行,一般持续2–4小时,确保偶联充分。
反应中控制摩尔比(Cy5:E2 ≈1:1)以获得单标记产物,避免多重标记影响雌二醇活性。
保护与选择性
对雌二醇分子中非目标羟基进行选择性保护,保证偶联的专一性。
偶联后可通过去保护步骤恢复原有羟基功能,维持分子活性。
纯化步骤
通过透析或高效液相色谱(HPLC)去除未反应的Cy5及副产物。
收集目标产物后进行冻干或溶液保存。
表征方法
UV-Vis光谱:确认Cy5特征吸收峰(约650 nm)。
荧光光谱:激发约650 nm,发射约670 nm,验证标记成功。
质谱与NMR:确认分子量及偶联结构的完整性。
水溶性与稳定性测试:确保CY5-Estradiol适合体内外实验条件。
应用示例
药物递送研究:CY5-Estradiol 可标记药物载体,观察体内分布与释放。
受体结合分析:通过荧光信号研究雌二醇与雌激素受体的结合动力学。
细胞成像与定量:用于荧光显微镜及流式细胞术研究,提供定量和定位信息。
产品名称:Cy5-Estradiol,花菁染料CY5标记雌二醇
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09