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Biotin-Hadrucalcin,生物素标记蠍毒桥肽的结构
发布时间:2025-09-22     作者:YFF   分享到:

英文名称: Biotin-Hadrucalcin

中文名称: 生物素标记蠍毒桥肽

Biotin-Hadrucalcin是一种将生物素(Biotin)与蝎毒来源的钙通道激活剂Hadrucalcin通过化学修饰结合的复合物。Hadrucalcin源自北美巨型蝎(Hadrurus gertschi)毒液,属于“钙素”(Calcin)家族,其33个氨基酸残基通过三对二硫键形成稳定的三维结构,能够特异性识别并激活ryanodine受体(RyR),调控细胞内钙离子释放。

生物素作为标记基团,其尿素环结构可与链霉亲和素(Streptavidin)形成高亲和力(Kd≈10⁻¹⁵ M)的非共价结合,为Hadrucalcin的功能研究提供了便捷的检测手段。例如,在钙成像实验中,Biotin-Hadrucalcin可先与细胞表面RyR结合,再通过链霉亲和素-荧光微球复合物实现受体定位的可视化;在 pull-down实验中,生物素化的Hadrucalcin可作为“诱饵”蛋白,从细胞裂解液中富集与其相互作用的RyR亚基或其他调控蛋白。

合成路径通常采用固相肽合成(SPPS)技术制备Hadrucalcin,再通过N-端引入赖氨酸残基,利用其侧链氨基与生物素N-羟基琥珀酰亚胺酯(Biotin-NHS)反应形成偶联产物。纯化后的Biotin-Hadrucalcin需通过圆二色光谱(CD)确认二级结构完整性,并通过表面等离子共振(SPR)验证其对RyR的亲和力是否保持天然水平。

Biotin-Hadrucalcin

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