Cyanine5-Thyroglobulin，花菁染料CY5标记甲状腺球蛋白的反应活性分析

甲状腺球蛋白（Thyroglobulin，Tg）是一种由甲状腺滤泡细胞分泌的大分子糖蛋白，分子量通常超过 600 kDa，由两条相似的亚基组成。其结构中包含丰富的氨基酸残基，尤其是赖氨酸（Lys）、半胱氨酸（Cys）、酪氨酸（Tyr）等可作为化学修饰或标记的反应位点。由于 Tg 是合成甲状腺激素（T3、T4）的前体，在生物化学研究和免疫学实验中，它常作为重要的模型抗原或研究对象。

在 Cyanine5-Thyroglobulin 中，引入了花菁类荧光染料 Cy5 作为共价标记。Cy5 分子属于典型的多亚甲基花菁染料，由两个氮杂芳香环通过五个亚甲基共轭链连接，形成大范围 π 共轭体系。这种结构决定了 Cy5 在红光至近红外区域具有强烈吸收与发射（λ_ex ~648–650 nm，λ_em ~665–670 nm），其荧光信号强、光稳定性好，且背景干扰小，非常适合用于生物大分子的标记和活体成像。

标记方式与结构特点

Cy5 通常通过其活化衍生物与蛋白质进行偶联。常见的是 Cy5-NHS 酯，可以与蛋白质分子中赖氨酸残基的 ε-氨基或 N 端氨基反应，形成稳定的酰胺键。此外，也可通过 Cy5-马来酰亚胺与半胱氨酸残基的巯基反应，得到特异性更高的标记。经过标记的 Tg 保持了蛋白质的基本构象，同时表面分布多个 Cy5 分子，从而在红光波段具备强烈的荧光信号。标记密度（degree of labeling, DOL）通常可控，一般保持在每个 Tg 分子 3–10 个 Cy5，以兼顾荧光强度和蛋白活性。

反应活性分析

赖氨酸残基反应活性

Tg 蛋白表面分布大量赖氨酸，其 ε-氨基在 pH 7.5–8.5 范围内具备良好亲核性，能够与 Cy5-NHS 酯发生高效反应。这是常用的标记方式，偶联效率高，生成的酰胺键稳定，不易水解。

半胱氨酸残基反应活性

Tg 含有多个二硫键结构，部分在还原条件下可以暴露出自由巯基。这些 –SH 基团与 Cy5-马来酰亚胺衍生物反应性很高，可形成选择性较强的硫醚键。通过这种方法，可以实现定点或低位点标记，减少对蛋白质整体结构和功能的干扰。

酪氨酸及其他残基修饰

在特定条件下，Tg 上的酪氨酸残基也可通过偶氮化或碘化等化学方法进行间接修饰，再与 Cy5 偶联。不过这种方式较少应用于直接荧光标记，更多用于功能性衍生修饰。

标记后活性保持

由于 Cy5 偶联主要发生在蛋白质表面可及残基，通常不会破坏 Tg 的整体折叠和功能区域。因此，Cy5-Thyroglobulin 能在保持其免疫学活性的同时，提供荧光示踪功能，适用于 ELISA、免疫印迹、流式细胞术和成像实验。

物理与光学特性

Cy5-Thyroglobulin 在水溶液或缓冲液中保持良好的分散性和稳定性。其荧光发射峰在 ~670 nm，避免了组织自发荧光的干扰，适合在复杂生物环境中成像。由于 Tg 是大分子糖蛋白，Cy5 的修饰密度较高时可能导致轻微的聚集，但通过优化缓冲液组成（如添加甘油或 BSA）可以避免荧光淬灭现象。

应用价值

Cy5-Thyroglobulin 的优势在于兼具大分子抗原活性与荧光可视化能力。它可用作免疫反应研究中的示踪探针，帮助分析抗体识别、抗原摄取与处理过程；在纳米载体或表面修饰实验中，Cy5-Tg 可作为模型蛋白，用于研究大分子修饰后的界面行为；此外，它还可应用于活细胞成像和体内分布研究，利用其红光荧光信号对蛋白质动力学进行实时监测。

产品名称：Cyanine5-Thyroglobulin，花菁染料CY5标记甲状腺球蛋白

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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