CY510%-PAMAM,花菁染料CY5标记聚酰胺-聚酰胺-胺型树枝状聚合物的纯化过程
聚酰胺-聚酰胺-胺型树枝状聚合物(PAMAM dendrimer)是一类具有高度分支和规则结构的高分子材料,用于药物递送、基因转染和表面修饰。其分子骨架由重复的酰胺和胺单元组成,终端氨基数量随代数增加呈指数增长,具有高密度功能位点。通过部分氨基与花菁染料Cy5发生偶联,可获得10%修饰度的Cy5-PAMAM,即每100个末端氨基中约有10个连接Cy5染料,既保证了荧光可视化功能,又保留了大部分氨基供进一步化学修饰或分子结合。
合成过程:
前体准备:选用不同代数的PAMAM(如G4或G5),其末端含有伯胺。根据代数不同,氨基数量从64至128个不等。
染料活化:通常采用Cy5-NHS ester作为染料前体。该活性酯可与伯胺快速发生酰胺化反应,生成稳定的酰胺键。
控制反应比例:为实现10%的标记率,将Cy5-NHS与PAMAM末端氨基以约1:10的摩尔比加入反应体系。溶剂通常为无水DMF或PBS缓冲液(pH 8.0–8.5),并加入适量碱(如DIPEA)以促进反应。反应时间约为12–24小时,避光条件下进行以保护荧光染料。
反应结束:产物含有部分未反应的Cy5染料和游离小分子副产物,需要进一步纯化。
纯化过程:
透析法:将反应混合物置于透析袋(MWCO 10–30 kDa)中,利用大分子与小分子的分子量差异,通过水或PBS反复透析48小时,去除未结合的Cy5与小分子副产物。
凝胶过滤色谱(GPC):进一步分离不同标记度的PAMAM,提高产物均一性。
冷冻干燥:将纯化溶液冷冻干燥,得到稳定的Cy5-PAMAM固体粉末。
表征方法:
UV-Vis光谱:检测Cy5的特征吸收峰(约646 nm),并计算修饰度。
荧光光谱:确认近红外发射(约662 nm)是否保持。
质谱与核磁(^1H NMR):验证染料偶联位置与产物分子量变化。
DLS与TEM:检测产物在水溶液中的粒径与形貌。
整体上,Cy5-10%-PAMAM通过控制修饰比例和严格的纯化步骤,获得兼具树枝状聚合物高密度功能位点与Cy5荧光性能的杂化结构,适合应用于药物递送、基因标记和体内外成像研究。
产品名称: CY510%-PAMAM
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09