Cy5-rituximab，花菁染料CY5标记利妥昔单抗的反应原理解析

利妥昔单抗（Rituximab）是一种针对B细胞CD20抗原的嵌合型单克隆抗体，用于免疫研究和临床。将其与花菁染料Cy5共价标记，可以获得兼具免疫识别功能和近红外荧光能力的复合分子——Cy5-Rituximab。其反应原理主要涉及氨基-活性酯偶联机制，结合蛋白质表面赖氨酸残基的亲核反应特性。

反应原理解析：

活性基团设计：

Cy5染料通常以NHS酯（N-羟基琥珀酰亚胺酯）形式存在，碳酰基活化以提高亲核攻击反应效率。

利妥昔单抗分子表面含有大量赖氨酸侧链氨基和N端伯胺，可作为亲核试剂与Cy5-NHS酯反应。

亲核攻击机制：

赖氨酸氨基的孤对电子攻击Cy5-NHS酯碳基，形成稳定的酰胺键，同时释放NHS离子。

反应在温和缓冲体系（pH 7.5–8.5）中进行，既保证赖氨酸氨基的活性，又维持抗体构象的稳定性。

选择性与空间影响：

由于抗体分子具有复杂的三级结构，NHS酯主要与暴露在表面的赖氨酸残基结合，避免影响抗体的抗原结合位点（Fab区域）。

Fc段表面的偶联通常不会干扰免疫学功能，确保Cy5-Rituximab在免疫识别和信号传导中的活性保留。

反应动力学控制：

偶联反应速率受pH、温度和染料/抗体摩尔比控制。

为避免过度标记造成抗体构象改变或聚集，通常采用低摩尔比的Cy5-NHS酯，并通过短时间反应实现适度修饰。

产物稳定性：

形成的酰胺键化学稳定，在中性缓冲体系及生理条件下可长期保持结构完整。

Cy5染料的荧光特性使得标记抗体可以用于近红外成像、荧光免疫分析和流式细胞检测。

总结：Cy5-Rituximab的标记基于NHS酯与抗体赖氨酸氨基的酰胺化反应原理。该方法温和、高效，并且保留抗体的抗原结合能力，同时赋予其荧光示踪功能，为细胞靶向分析、组织成像及免疫检测提供可靠工具。

产品名称：Cy5-rituximab，花菁染料CY5标记利妥昔单抗

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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