常用名 6-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯
英文名 6-FAM SE
CAS号 92557-81-8
分子量 473.388
密度 1.7±0.1 g/cm3
沸点 788.1±70.0 °C at 760 mmHg
分子式 C25H15NO9
熔点 N/A
闪点 430.4±35.7 °C
6-FAM Succinimidyl Ester是一种功能化荧光染料,结合了 6-羧基荧光素(6-FAM)的高亮度绿色荧光特性与活化 NHS 酯(N-hydroxysuccinimide ester)官能团的高反应活性。6-FAM NHS 酯是现代生物化学和分子生物学实验中广泛使用的荧光标记试剂,尤其适用于蛋白质、多肽、寡核苷酸以及其他生物分子或功能化材料的共价标记。其反应条件温和、效率高、标记稳定,是构建荧光探针、成像工具和生物分析体系的重要分子。
化学结构与特性
6-FAM Succinimidyl Ester 主要由三部分组成:
荧光素核心(Fluorescein, 6-FAM):6-FAM 是荧光素的羧基衍生物,具有高度共轭的芳香环系统,可在激发波长约 495 nm 下吸收光,并在约 520 nm 波长发射绿色荧光。荧光强度高、量子产率优良、光稳定性良好,适用于体外和体内的荧光检测与成像。
羧基(Carboxyl, –COOH):6-FAM 的羧基不仅提供水溶性,还可通过 NHS 酯活化后与氨基或其他亲核基团形成稳定的酰胺键,实现分子的共价偶联。
NHS 酯官能团(Succinimidyl Ester, –OSu):末端 NHS 酯是常用的活化酯,可与蛋白质、肽链、氨基修饰的核酸及其他氨基化分子高效反应,形成稳定的酰胺键。反应条件温和,一般在 pH 7–9 的缓冲体系中进行,对生物体系低毒且选择性高。
主要应用
蛋白质标记:6-FAM NHS 酯可与蛋白质表面的赖氨酸氨基共价结合,实现绿色荧光标记,用于体外分析、荧光定量及成像实验。
多肽偶联:通过氨基化修饰的多肽与 NHS 酯反应,可构建荧光标记的肽探针,用于细胞内追踪或蛋白相互作用研究。
核酸标记:适用于末端氨基化寡核苷酸的标记,实现荧光检测和荧光原位杂交实验(FISH)等应用。
纳米材料功能化:可将 NHS 酯与氨基化的纳米颗粒、脂质体或聚合物偶联,实现功能化探针或靶向递送体系构建。
生物成像与检测:6-FAM 标记体系可用于细胞内成像、荧光探针开发及生物分子动态观察,便于研究分子分布和行为。
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