Cy5-Tobramycin，花菁染料CY5标记妥布霉素的反应步骤

Cy5-Tobramycin 是通过在氨基糖抗生素妥布霉素（Tobramycin）分子上引入花菁染料Cy5标记而形成的荧光探针复合物，其制备步骤通常基于妥布霉素分子上多位伯胺和仲胺的高反应活性。妥布霉素属于氨基糖苷类抗生素，分子含有多个氨基和羟基，能够与活化的染料分子通过酰胺化或点击化学形成稳定的共价结合。其标记步骤通常分为以下几个环节：

首先，需要选择合适的Cy5衍生物。常用的是带有 NHS酯（Cy5-NHS ester） 或者 异硫氰酸酯（Cy5-ITC） 的活化染料，这类化合物能够特异性地与伯胺反应生成稳定的酰胺或硫脲键。由于妥布霉素分子上的氨基较多，为避免过度标记，需要通过控制摩尔比、反应时间和缓冲液的pH来限定修饰程度，一般采用 pH 8.0～8.5 的碳酸盐缓冲液，以确保氨基处于去质子化状态，提高与Cy5-NHS的反应效率。

反应步骤一般包括：将妥布霉素溶解于缓冲液中，并逐步加入溶解在DMSO中的Cy5-NHS ester溶液，缓慢搅拌反应2–4小时。反应过程中，控制Cy5与Tobramycin的摩尔比在 1:1至1:3之间，以保证获得单一标记产物而不是多位交联。完成反应后，通常需要通过透析、凝胶过滤色谱（如Sephadex G-25）或反相HPLC去除未反应的自由染料。

在特定条件下，也可以使用 点击化学修饰 来实现Cy5与Tobramycin的偶联。例如，先通过化学方法在妥布霉素的氨基上引入叠氮（–N3）或炔基（–C≡CH）修饰，然后使用带有相反官能团的Cy5衍生物（如Cy5-DBCO或Cy5-alkyne）通过铜催化或无铜应变环炔点击反应偶联。这一方法的优点是位点选择性更好，副反应更少。

终获得的Cy5-Tobramycin可通过质谱（MALDI-TOF）、紫外-可见吸收光谱（检测Cy5在650 nm左右的吸收峰）、荧光光谱（Ex/Em约为649/670 nm）和HPLC纯度检测来进行表征。整个反应步骤简便，能够在温和条件下完成，既保持了妥布霉素的结构活性，又赋予其稳定的红区荧光标记，适合于抗生素分布与作用机制的研究。

产品名称：Cy5-Tobramycin，花菁染料CY5标记妥布霉素

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

推荐产品：

CY7单体

花菁染料ICG标记丹皮酚

ICG-Paeonol

花菁染料ICG标记毛果芸香碱

ICG-Pilocarpine

92-13-7

花菁染料标记V5多肽

CY3-V5

仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09