CY5-OA，花菁染料CY5标记油酸的反应体系条件

油酸（Oleic Acid, OA, CAS 112-80-1）是一种单不饱和脂肪酸，分子含有 C18 碳链和一个顺式双键，末端为羧基，具有疏水性。将其与花菁染料 Cy5 偶联，可得到荧光标记脂质（Cy5-OA），用于细胞膜成像、脂质动力学研究及药物递送系统追踪。其反应条件主要涉及羧基活化、胺基亲核攻击和温和溶剂体系。

羧基活化

Cy5-OA 的偶联反应通常以 OA 末端羧基为活化位点。可使用 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）和 1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐（EDC·HCl）共同作用，将 OA 羧基活化为 NHS 酯。这一步一般在干燥 DMF 或 DMSO 中进行，反应体系保持弱碱性或中性，以提高活化效率并减少羧基自缩合。反应温度通常控制在室温至 25 ℃，避光操作。

Cy5 引入

选用 Cy5-NH2 或 Cy5-amine 作为偶联试剂，溶解在 DMSO 或 DMF 中。将活化后的 OA-NHS 酯缓慢加入 Cy5 溶液中，借助伯胺或仲胺的亲核攻击形成稳定的酰胺键。反应时间一般为 6–12 小时，以保证完全偶联。

反应体系条件

pH：通常维持在 7.5–8.5，利于胺基去质子化，增强亲核活性；

溶剂：DMSO、DMF 或含少量 PBS 的有机混合体系，可兼顾脂质疏水性与 Cy5 溶解性；

温度：室温至 30 ℃，过高温度可能导致 Cy5 光漂白或 OA 双键氧化；

光照：全程避光，避免染料光化学降解。

反应终止与纯化

反应完成后，可加入过量乙醇胺封闭未反应 NHS 酯，随后通过 HPLC 或透析（1 kDa 截留膜）去除未偶联的 Cy5 和副产物。纯化产物可冻干储存，便于长期使用。

产物特性验证

UV-Vis 光谱显示 640 nm 附近的 Cy5 特征吸收峰；

荧光光谱激发 640 nm，发射峰 670 nm 附近；

质谱（ESI-MS 或 MALDI-TOF）显示分子量增加约 700–800 Da，确认酰胺偶联；

NMR 可观察到 OA 末端羧基消失及新酰胺峰出现。

稳定性与储存

Cy5-OA 应避光、低温储存（−20 ℃）。溶液状态下可使用少量有机溶剂辅助溶解，短期实验室操作可在 4 ℃ 保存数天。

综上，Cy5-OA 的偶联反应条件以 羧基活化（EDC/NHS）与胺基亲核偶联 为核心，温和、避光、控制 pH 与溶剂体系是保证反应效率和产品稳定性的关键。得到的 Cy5-OA 可应用于脂质动力学研究、膜结构追踪及纳米载体荧光标记实验。

产品名称：CY5-OA，花菁染料CY5标记油酸

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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