CY3-TUZG12,花菁染料标记特异性多肽TUZG12的合成路线
CY3-TUZG12是将特异性功能多肽TUZG12与花菁类荧光染料Cy3结合而成的一类荧光探针。TUZG12作为一种人工设计的短肽,通常通过氨基酸序列的优化赋予其特定的靶向性或结合能力,例如识别特定的受体、膜蛋白或胞外基质组分。与传统RGD、IKVAV等通用性序列相比,TUZG12在应用中更具特异性和稳定性,因此可作为研究分子识别机制与构建新型生物探针的理想候选。
Cy3是一种常用的花菁染料,具有550 nm左右的吸收峰和565–570 nm的发射峰,荧光信号强烈,光稳定性良好。通过将Cy3与TUZG12偶联,可以实现对多肽分布、结合行为和细胞摄取过程的可视化追踪。CY3-TUZG12兼具分子识别功能与荧光成像能力,因此应用于生物材料界面研究、受体-配体结合实验、药物传递系统标记以及体外细胞实验中的实时检测。其物理化学性质表现为橙红色固体或冻干粉末,溶于水、PBS或DMSO,溶液中呈现明亮的橙红色荧光。
CY3-TUZG12 合成路线
CY3-TUZG12的合成通常遵循“先肽后标记”的路线,主要分为三大步骤:TUZG12多肽的固相合成、荧光染料Cy3的活化、以及多肽与染料的偶联与纯化。
多肽TUZG12的合成
TUZG12序列通过固相肽合成(SPPS)技术获得。常采用Fmoc策略,在Rink amide树脂或Wang树脂上逐步延伸肽链。每个氨基酸在偶联前使用HBTU/HOBt/DIPEA活化,在树脂上依次偶联,完成后通过哌啶/DMF脱去Fmoc保护基。如此循环直至全序列完成。合成过程中,侧链基团通常使用tBu、Pbf等保护,避免副反应。合成结束后,用三氟乙酸(TFA)/水/三异丙基硅烷(TIS)的混合液裂解树脂并去除保护基,粗品经乙醚沉淀、冻干获得。
Cy3染料的活化
Cy3常以NHS酯或maleimide等活性衍生物的形式参与偶联。若TUZG12的N端保留游离氨基,可采用Cy3-NHS ester;若序列中特意引入半胱氨酸,则通过巯基与Cy3-maleimide偶联。此类活化染料具备高反应性,可在温和条件下与多肽共价结合,同时避免破坏多肽活性序列。
偶联反应
在偶联步骤中,将纯化后的TUZG12溶于碳酸盐缓冲液(pH 8.3),并加入少量DMSO溶解的Cy3-NHS ester,保持摩尔比约为1:1.2–1.5。在避光条件下室温反应2–3小时。若使用maleimide偶联,则缓冲液pH控制在6.5–7.0,以保证巯基与maleimide的高效选择性反应。反应完成后,体系中既包含目标产物CY3-TUZG12,也含有未反应的染料和肽,因此需通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)进行分离。收集主峰并冻干,即得高纯度CY3-TUZG12。
表征与确认
合成后的CY3-TUZG12需通过质谱(MALDI-TOF或ESI-MS)确认分子量,并通过HPLC检测纯度。光谱学表征包括紫外-可见吸收(λmax ≈ 550 nm)和荧光发射(λem ≈ 565–570 nm),以验证Cy3标记成功。终产物在PBS溶液中应呈现均一的橙红色荧光,且保持TUZG12的特异性识别能力。
产品名称:CY3-TUZG12
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09