Cy5-NTA-NI,花青素5标记氮川三乙酸-镍的化学构建
花菁素5标记氮川三乙酸-镍(Cy5-NTA-Ni, Cy5-NTA-Ni²⁺)是一种结合荧光标记与金属螯合配体的功能分子,常用于特异性识别与纯化带有His标签的蛋白质。氮川三乙酸(NTA, nitrilotriacetic acid)是一种含有三个羧基和一个叔胺氮的多齿螯合剂,可以与过渡金属离子形成稳定配位结构。NTA常用于修饰表面或连接荧光团,在配位镍离子(Ni²⁺)后,形成NTA-Ni²⁺复合物,该结构能够特异性识别蛋白质上的多组氨酸标签(His₆-tag),利用咪唑环上的氮与Ni²⁺形成配位键,从而实现靶蛋白的捕获或定位。
在化学构建中,Cy5-NTA的合成通常通过在NTA分子的一端引入一个活性基团(如琥珀酰亚胺酯),与Cy5-NH2偶联,形成稳定的酰胺键,得到Cy5-NTA。随后再用NiCl₂或NiSO₄水溶液处理,使NTA的羧基与氮原子配位镍离子,生成Cy5-NTA-Ni复合物。终产物兼具荧光示踪与金属螯合功能。
其化学反应原理主要体现在以下几个方面:
金属螯合反应:NTA的四个配位原子(一个氮+三个羧基氧)与Ni²⁺形成六配位八面体结构中的四个位点,其余两个空位由蛋白质His标签的咪唑氮来补充,形成稳定的六配位配合物。
荧光功能耦合:Cy5荧光基团通过酰胺键与NTA共价连接,不参与配位反应,但能够作为示踪标签,实现荧光信号与金属螯合识别的同步。
可逆结合原理:His标签蛋白与NTA-Ni²⁺的结合是可逆的,加入高浓度咪唑或EDTA可竞争结合Ni²⁺或螯合Ni²⁺,实现蛋白的释放。这一机制保证了实验中的可控性和重复利用性。
选择性与特异性:NTA-Ni²⁺与His标签结合的亲和力远高于非特异性蛋白,因此可用于高选择性地捕获和检测靶蛋白。结合Cy5的荧光特性,还可以通过荧光成像或荧光定量技术实现可视化分析。
因此,Cy5-NTA-Ni是一种典型的“功能融合”分子,既保留了NTA-Ni²⁺体系对His标签的高选择性螯合原理,又借助Cy5荧光团实现了荧光标记和成像功能。在应用中,它被用于蛋白质纯化、荧光标记、生物芯片表面功能化以及活细胞蛋白质动态追踪,是分子生物学和纳米生物技术领域的重要工具。
产品名称:Cy5-NTA-NI
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09