Sulfo-Cy3.5-Streptavidin,磺酸基CY3.5标记链霉亲和素的化学反应原理
Sulfo-Cy3.5-Streptavidin是一种将水溶性近红外荧光染料CY3.5与链霉亲和素(Streptavidin, SA)偶联形成的功能性标记分子。SA是一种具有高亲和力结合生物素(Biotin)的蛋白质,可用于多种生物标记和靶向实验。通过CY3.5标记,Sulfo-Cy3.5-Streptavidin能够实现蛋白质或纳米载体的荧光追踪及可视化分析。磺酸基提高水溶性和生物相容性,保证在生物体系中的稳定性。
化学组成与特性:
CY3.5荧光核心:提供近红外激发(约675 nm)和发射(约695–700 nm)波长,荧光强度高、背景低、光稳定性好,适合细胞成像及体内追踪。
磺酸基修饰:增强水溶性,防止染料自聚集,提高分子在缓冲液及血浆中的稳定性,降低非特异性结合。
Streptavidin蛋白:四聚体结构稳定,对Biotin具有高亲和力(Kd ~10⁻¹⁵ M),可作为连接Biotin化分子或载体的中介。
化学反应原理:
Sulfo-Cy3.5-Streptavidin的偶联通常基于NHS酯与蛋白质氨基的酰胺化反应:
CY3.5活化:CY3.5羧基通过磺酸基NHS酯活化(Sulfo-Cy3.5-NHS),形成高反应性亲电中心。
蛋白偶联:SA蛋白的游离氨基(主要是N端氨基和赖氨酸侧链)与NHS酯发生亲核进攻,生成稳定的酰胺键(–CO–NH–),释放NHS。
反应条件:反应通常在弱碱性缓冲液(pH 7.4–8.5)中进行,温和室温下搅拌数小时至过夜,可实现高效率偶联,同时保持SA蛋白的构象和Biotin结合能力。
纯化与表征:通过透析、凝胶过滤或HPLC去除未反应的染料及副产物,使用质谱、UV-Vis光谱和荧光光谱验证分子量和功能性。
特点与应用:
高水溶性和生物相容性:磺酸基保证分子在生物体系中稳定,减少非特异性吸附。
稳定的荧光标记:Cy3.5近红外荧光适合细胞及体内成像。
特异性Biotin结合:SA结构保持完整,可与Biotin化蛋白、核酸或纳米载体形成强亲和力复合物,实现靶向标记和追踪。
应用范围:用于生物检测、免疫分析、纳米载体标记、活体成像及药物递送追踪。
产品名称:Sulfo-Cy3.5-Streptavidin
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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